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微型注射食虫植物细胞对大鼠的有机Ischemia/再生损伤的保护作用

标题、摘要和全文为机器翻译。 英文原文

  • Burcu Kasap1 (通讯作者)
  • Sukru Kasap1
  • Seda Vatansever2
  • Remziye Kendirci2
  • Osman Yilmaz3
  • Meryem Calisir3
  • Ummuhani Ozel Turkcu4
  • Melike Nur Akin5
  • Eren Akbaba5
  • Nilgun Ozturk Turhan5
  1. Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi ROR
  2. Department of Histology-Embryology, School of Medicine, Celal Bayar University, Manisa, Turkey. ROR
  3. Department of Laboratory Animal Science, School of Medicine, Dokuz Eylul University, İzmir, Turkey. ROR
  4. Department of Clinical Biochemistry, School of Medicine, Mugla Sitki Kocman University, Mugla, 48000, Turkey ROR
  5. Department of Obstetrics and Gynecology, School of Medicine, Mugla Sitki Kocman University, Mugla, 48000, Turkey ROR

摘要

导言: 提交人调查了脂肪衍生干细胞(ADSC)的免疫史、组织学和生化作用,这些干细胞在卵巢异血/再生鼠模型中具有抗氧化剂和抗炎性能。 材料和方法:鼠类被随机分配给假鼠,ADSC,躯干/脱鼠,躯干/脱鼠/脱鼠群. ADSC在6小时的吸附期后,在驱离过程中被微量注射到躯干/检测器/ADSC. 使用了BrdU、caspase-3、TUNEL、eNOS和iNOS的污渍。 高级氧化蛋白产物(AOPPs),超氧化脱氧酶(SOD)活性,以及总磺酰基(TSH)水平均得到评价. 结果:血清AOPP在躯干/脱粒、组织和血清AOPP水平上在躯干/脱粒/ADSC组中有所增加。 与假肢组相比,躯干/脱粒和躯干/脱粒/ADSC组中的组织SOD活动大幅减少。 iNOS在躯干和脱壳后在躯干/脱壳组中较强,但在ADSC微注射后在躯干/脱壳/脱壳组中下降。 躯干-脱氧核糖核酸后的ADSC治疗也降低了caspase-3免疫活性及apoptotic细胞号. 结论:在躯干/脱臼后实施ADSC可能会保护卵巢免受异血症/再生损伤.

关键词

全文

全文为机器翻译;以英文原文为准。 英文原文

导言

肾上腺腐蚀、输卵管和卵巢的旋转占妇科紧急情况的2.7%-3% (1)由于大多数病例发生在生殖年龄,早期诊断和有效治疗对于维持卵巢储备和激素功能至关重要。 血栓切除术(Salpingo-oophoralectomy)是以前最可取的管理方法,因为血栓切除术有风险,而且卵巢外观可能出现恶性;但最近的研究建议希望保护其生育力的病人进行卵巢切除术。 (2)在卵巢躯干中,坏疽和阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阴性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性阳性 (3)在通过脱氧再排卵后,由于氧气水平的提高,许多反应性氧物种,即羟基、过氧化氢和超氧化物基得到发展。 (4, 5)高水平的ROS导致DNA损伤、内皮破坏和颗粒细胞死亡 (6, 7)为了改善卵巢消毒手术的结果,对许多有前途的抗炎剂和抗氧化剂进行了调查,如阿托尔瓦斯塔丁、加列加·欧尼西纳利斯、欧莱亚·欧帕埃亚和诺卡帕林。(8–11)人类脂肪衍生干细胞(ADSCs)是从人类脂肪组织中衍生出来的,是一种优越的生物材料,可以适用于过量移植和再生医学. (12). ADSC在基本培养条件下稳步扩张,表现出较低的污染风险,在移植后免疫排斥度较低 (13) . ADSC还具有抗氧化剂和抗炎特性,最近被用于肝和脑的许多大鼠I/R模型 (12, 14)此外,还正在调查妇科和妇科的化疗细胞,如Asherman综合征、泌尿失禁和早产 (15–17)此外,先前的研究表明,从ADSC中分泌的细胞基质可以抵抗自然卵巢衰老的过程。 (18)最近有证据表明,人类ADSC衍生的外吸虫通过增加扩散率和抑制人类颗粒细胞的吞噬率来恢复早产卵衰竭的功能。 (19)。 。 。

在这次研究中,我们的目的是调查卵巢躯干/脱臼手术对I/R损伤的ADSC的影响.

材料和方法

动物

这项研究共分配了25只成年、处女、10至12周的老雌性维斯塔白化鼠。 这些动物(170-210克)的居住条件为20-24°C、12小时的日/夜周期和50-60%的湿度。 Dokuz Eylül大学动物研究伦理委员会批准了本研究的动物议定书(第28/2015号批准书)。 动物研究调查符合符合多库兹·埃柳尔大学人类护理委员会的实验准则。

ADSC 隔离

ADSC与5只没有分配给实验组的大鼠隔离. 腹膜内10毫克/千克(德国Rompun、Bayer、Leverkusen)盐酸 x和50毫克/千克氯胺酮服用(土耳其Ketalar、Eczacibasi)引起麻醉。 抗败毒溶液被用于手术现场准备,双边腹股沟脂肪垫被移除. 脂肪组织在无菌的磷酸盐(PBS)中经过密集处理,青霉素-链霉素占5%。

α-MEM中,在37°C时含有0.1%的1型焦糖酶的组织与手术刀分离,并孵化30分钟。2个然后,将组织转移到培养媒介(胎儿牛血清(FBS)、α-MEM、1%L-glutamine),在两次离心后,在α-MEM/10%FBS、50微克/毫升链球菌素和50微克/毫升青霉素(37°C和5%CO)的湿化孵化器中种植。2个 (20)在10天的种植期内,媒体每两天更换一次。

ADSC的特点

这些细胞在PBS中固定在4%的准醛中30分钟,并用0.1 Triton X-100(A4975, AppliChem, Darmstadt,德国,在用PBS洗涤后,经过15分钟的渗透. 细胞的内生过氧化物活性通过孵化得到,在室温下用3%的过氧化氢(K31355100, Merck, Darmstadt, Germany)进行5分钟. 之后,用PBS冲洗细胞. 清洗后,细胞按照制造商的指示(85-9043,Invitrogen, CA, CA, CA, CA, CA, CA)孵化为1h的阻塞血清. 抗CD-34(ab51037,Abcam)和抗CD-44(BA3382,BOSTER)初级抗体在一夜之间被稀释为1:25和4°C (20)初级抗体被移除,细胞被用PBS冲洗. 依次添加了生化化羊IgG,抗兔/mouse IgG二级抗体,以及过氧化物结合的streptavidin(D01-110,生命科学司),每一步孵化30分钟. 在这些孵化期之间,3次用PBS冲洗牢房。 随后,样品被孵化为二氨基苯胺/过氧化氢(00-2020,Invitrogen)5分钟. 迈尔的血氧林(HMM999,Scytek实验室,美国犹他州西洛根)被用于对抗. 组织在蒸馏水中被冲洗,并安装了升降介质(AML060,Scytek),并用覆盖物覆盖在光显微镜下进行评估(Olympus BX40,Olympus Corp.,日本东京)。 对使用同类IgG而不是初级抗体的控制样品也采用了同样的程序。

治疗组

动物随机分布: 第一组(沙姆,盐碱n:4),第2组(ADSC,n:7),第3组(tors + detorsion + saline,n:6),第4组(tors + detorsion + ADSCs,n:8).

手术程序

如ADSC隔离法所述,大鼠在一般麻醉下进行苏平手术。 在刮刮并用抗败毒溶液清洗手术场所(土耳其巴蒂康,德罗格桑)后,做了2.5厘米的中线垂直切口.

第1组:Uterine corns and adnexa被视觉化. 之后,20μl的盐碱用微注射器单独管理到卵巢. 第2组:在暴露Annexa后,1×10页:1 20 μl PBS中的细胞/ml ADSC(包括2000个ADSC细胞)用微注射器单独管理到卵巢中 (13, 21)。 。 。

第3组:为制造躯干,带连接器皿的丁香通过顺时针旋转720°,旋转丁香通过5/0的丝缝固定在前墙上. 腹壁切口关闭. 在6小时的躯干期之后,通过旋转卵巢720°逆时针,对脱粒(再喷射)进行复垂切除术,两个卵巢均暴露在外. 之后,20μl盐水被单独管理.

第4组:如上文所述,进行了6小时的躯干和解剖程序。 卵巢在解剖过程中暴露后 1 x 10页:1 20 μl PBS中的细胞/ml ADSC(ADSC的2000个细胞)用微注射器单独管理 (13, 21)。 。 。

腹壁切口全部用3~0丝缝合关闭. 手术康复后,动物被单独安置. 在恢复期的7天后,所有动物都接受了腹腔切除术,并进行了腹腔切除术。 所有程序都由同样的研究人员进行。 其中一个配对卵巢被随机选取,并固定在10%的缓冲甲醛溶液中,用于组织学和免疫史化学分析,而另一个则被包装在油溶胶纸中,以进一步进行生化分析. 在通过低温休克牺牲大鼠之前 2毫升的血被从低劣的藤木中抽走 在5000rpm的血液样本离心15分钟后,血清在埃彭多夫管中采集. 油溶胶纸中的Eppendorf管和卵巢包被转移到干冰中,储存在-20°C,直到最后的生化分析.

组织病理学检查

组织样品在一个10%的缓冲醛溶液中固定48小时,通过酒精脱水,并插入石蜡. 帕拉芬区块被切成5-μm-thickness的区块(Leica RM2125RTS,Leica Biosystems,德国Nussloch). 血氧林和eosin污渍被用作例行协议. 检查了卵巢损伤的严重程度,如水肿、炎症、出血和拥挤。 在光显微镜(日本东京Olympus BX40)下使用图像分析方法(Image-Pro Plus 5.1)检查了所有部分. 同一位有经验的组织学家分析了组织部分。

免疫组织化学分析

为了进行免疫史化学分析,使用了脱氧核糖核酸转移酶 dUTP 昵称端标签(TUNEL)、Bromode oxyuridine/5-Bromo-2'-deoxyuridine(BrdU)、caspase-3、Endothelial nitricoxy synthase(eNOS)和可导性氧化氮合成酶(iNOS)的污渍。 免疫标签的强度分级如下:弱(+);中(++);强(+++). 两名观察员对试验条件视而不见。

TUNEL 阿萨伊

幻灯片与Entellan®(Merck 107961.0500)搭载,并由两位神学家独立检查. 100TUNEL-负或正-单元格按随机选择的字段计算。 确定了TUNEL阳性细胞的百分比。

生化分析

在pH 7.4的20mM磷酸盐缓冲中,有机组织被同化. 在14000 rpm的4号离心机上进行了同源化取样0 个 C 15分钟 离心后,超纳特被分为分析超氧化物离子酶(SOD)活性,高级氧化蛋白产物(AOPP),总磺酰基(TSH)和总蛋白水平,而粒子则用于 myeloperoxidase(MPO)活性.

SOD活动的衡量

对卵巢组织或血清的SOD活动进行了光谱测量 (22)卵巢和血清中的SOD活性分别作为单位/mg蛋白和单位/mL.

TSH 实验

对卵巢组织或血清的TSH水平进行了评估,通过使用减低的谷胱液形成线性标准曲线 (23)根据Lowry等人的资料,测量了含有十二硫酸钠的超纳物质中的蛋白质水平。 (24)组织和血清的TSH水平分别表示为μmol/mg蛋白和μmol/L。

AOPP 等级分析

根据Witko-Sarsat的分光测量方法测量了卵巢组织和血清中的AOPP水平 (25)。 。 。

MPO活动分析

Bradley的方法被用来测量卵巢中的MPO活性 (26)。 。 。

蛋白质分析共计

卵巢组织中蛋白质的总含量按照光谱测量法测量 (27)。 。 。

统计分析

提交人根据初步评估的老鼠结果确定了样本大小。 从这些差异中,一个覆盖双尾α值为0.05,β值为0.20(研究功率:80%). SPSS版本22.0软件(美国芝加哥)被使用. 通过Shapiro-Wilk测试评估了分布正常性。 结果为平均值±标准误差或中值(最小最大值)。 实验团体之间的差别是由对差异(ANOVA)和Tukey的事后试验的单向分析确定的。 Kruskal - Wallis被用于分析非参数数据。 页:1< 0.05被认为意义重大。

结果

ADSC 特性化的结果

反倾销委员会是CD 34(-)(负)和CD 44(+)(正)(图1)。 ADSC被证实不是肝脏干细胞是CD34(-),并且被确认是二聚体干细胞,因为它们是CD44(+).

图1:A:Brd-U、B:CD44、C:CD34、D:控制覆盖
Figure 1. A:Brd-U、B:CD44、C:CD34、D:控制积水

组织结果

在毛考中,第1,2,4组卵巢的颜色比第3组少了异化. 第1组观察到卵巢卵泡和小血管周围的纤维溃烂积聚,在第2组发现这些变化是在ADSC管理后减少的。 在使用ADSC第4组之后,第3组中大量检测到的结膜纤维溃烂积聚、渗入和吞噬细胞比任何其他组都减少(图2)。

图2 第1组、第2组、第3组和第4组卵巢组织史学分析:X400原放大
Figure 2. 第1组,第2组,第3组和第4组的卵巢组织史学分析:X400原放大

免疫组织化学结果

图3显示了卵巢组织脂肪化的TUNEL分析. 第1组和第2组没有观察到初级、二级或格拉菲亚卵泡的TUNEL阳性细胞。 然而,在Graafian卵泡的冕膜散热细胞和积聚细胞以及第3组的主要卵泡中检测到了寄生细胞。 第4组中,只有Graafian卵泡检测到TUNEL-阳性细胞,但数量低于第3组。 iNOS,eNOS,Caspase-3和BrdU的免疫组织化学分布分别见图3. 表1还显示了这些组别中的TUNEL、iNOS、eNOS、Caspase-3和BrdU的污渍水平。 BrdU的污迹只在第2组和第4组中呈阳性,证实在进行血压注射后卵巢组织中存在ADSC.

Table 1. 实验组中TUNEL、iNOS、eNOS、Caspase-3和BrdU的沉积水平
表1:实验组中TUNEL、iNOS、eNOS、Caspase-3和BrdU的浓度水平
图3:TUNEL分析后对1组,2组,3组和4组卵巢组织进行的opoptotic分析:X400.
Figure 3. TUNEL测定后,对1组,2组,3组和4组卵巢组织进行opoptotic分析:X400.

生化成果

所有群体组织和血清中的AOPP水平分别见表2和表3。 第3组组织中的AOPP水平高于第2组(第2组)页:1< 0.05),而第4组的AOPP水平低于第1组和第3组(页:1<0.05) (表2) (中文(简体) ). 血清AOPP在第3组中高于第1组和第2组(页:1< 0.05),但与第4类中经ADSC治疗后的第3类相比,这些物质明显减少(页:1< 0.05) (表3) (中文(简体) ). 表2和表3分别列出了所有群体组织中的SOD和MPO活动和TSH水平。 第3组中的组织SOD活动明显低于第1组(页:1<0.05] (中文(简体) ). 此外,我们发现,第4组的SOD活动大大低于第1组和第2组(第2组)的活动。页:1<0.05) (表2) (中文(简体) ). 第3组在卵巢组织中的MPO活性大于第2组(MPO).页:1>0.05 (表2) (中文(简体) ).

Table 2. 组织实验组中的AOPP、MPO、SOD和TSH水平
表2:实验组中的组织AOPP、MPO、SOD和TSH水平
Table 3. 实验组中的血清AOPP、SOD和TSH水平
表3:实验组中的血清AOPP、SOD和TSH水平

讨论情况

据推测,由于ADSC具有抗氧化剂和抗炎性能,它们可能会改善卵巢切除/脱粒手术造成的I/R损伤的有害影响,本研究报告证实了这一点,表明在ADSC实施后,组织和血清AOPP以及组织SOD水平都有所下降。 因此,用ADSC在卵巢躯干模型中进行附着治疗,可能会通过减少组织与血清中的ROS,减少吞噬细胞的数量和炎症过程来减轻卵巢损伤. 据报道,最近对ADSC对人类不孕症和生殖系统的影响和机制提出了许多意见。 在Manavella等人的一项研究中,ADSC通过两步卵巢组织移植程序,将VEGF与人类卵巢组织一起移植到老鼠腹膜,从而区分为人类的血管,并促进VEGF的分泌. (28)他们表示,ADSC有可能改善卵巢组织的质量和寿命。 在Manavella等人的另一篇文章中,作者表明,在育后早期,卵巢组织与ADSC的氧化和血管化率较高,这与卵巢存活率的提高和卵巢硬化率的降低有关。 (29)此外,Sun等人还发现,移植到切除子宫的ADSC床单促进了子宫内膜细胞、肌肉细胞的再生并刺激了血管生长,还导致更好的妊娠结果。 (30)从这些数据可以看出,ADSC似乎对人类生殖系统和不孕症产生积极影响。

高水平的ROS可能对包括DNA、蛋白质和脂质在内的重要大分子造成一些损害,在诸如I/R引起的卵巢损伤等一些病理事件的发展过程中,它们起着重要作用。 (31)此类有害影响可能表现为卵泡(产前和角质)数量减少,以及陶瓷体数量增多和卵泡中颗粒素细胞病变。 (10). ROS与抗氧化剂之间的平衡会影响卵泡生长和成熟,因为通过减少ROS和抑制脂质过氧化作用的抗氧化剂补充剂可以导致防止细胞损伤,增强卵泡发育,提高受精率和胚胎发育. ROS的积累影响到人口疏导。 Shoorei等人发现,hesperidin的治疗导致Bcl-2基因(抗阿波提奇)和Bax基因(亲阿波提奇)的mRNA水平分别增加和降低. 赫斯佩里丁也被发现抑制了ROS的生成. AOPP由于稳定性而被广泛用作氧化剂介质蛋白损伤的可靠生物标志. (33). 过去,据报告,血浆或血清升高的AOPP与心肌硬化症恶化有关 (34)在这项研究中,对AOPP在血清和组织中进行了测量,以估计氧化剂介导蛋白损伤,最后发现ADSC治疗在I/R损伤后降低了卵巢组织和血清中的AOPP水平。 SOD和磺酰基组是重要的抗氧化剂,可以保护细胞免受自由基毒性的影响。 (35)根据以往的研究,在卵巢I/R模型中发现组织SOD活性下降 (35) Shojafar等人在小鼠体内进行了双孔切除/自发移植,并实施了自动切除/自动移植到自发卵巢中,以建立一个I/R损伤实验模型 (36) 他们还介绍了自动移植卵巢中的SOD减少和自动移植+组中的SOD增加的情况。 ADSC(英语:ADSC). 然而,在目前的研究中,SOD活动没有受到ADSC治疗的重大影响。 此外,与1号控制组相比,接受卵巢切除的组的TSH水平有所下降,2号控制组的TSH水平高于其他组。 然而,这些调查结果在统计学上并不重要。 此外,在所有群体中,系统化的SOD和TSH水平没有显著差异。

在IR期间,增加的ROS和其他生物兴奋剂激活了炎症细胞,导致中微营养素流入受影响的地点. MPO由激活的神经元释放,导致ROS和HCLO的形成. (37)发现卵巢I/R后MPO活性明显增加,但ADSC治疗后MPO活性明显减少. 组织学分析与这一观察一致;淋巴细胞渗入第3组,经ADSC治疗后略有减少。

氧化氮(NO)在挥发、免疫、炎症和虫病方面起着重要作用。 作为亚努斯分子,NO根据其异构,如eNOS或iNOS,使用有益和有害的效果。 (38)在这项研究中,他们发现ADSC治疗减少了第4组的iNOS表达,而第3组为3个。 几项研究表明,这与炎症和人口疏导有关。 以前的研究表明,卵巢细胞在卵巢I/R的实验模型中显著增加。 (8)在这项研究中,用TUNEL和caspase-3的污渍对鼠疫进行了化学免疫评估。 Manavella等人将5个不同患者的冻-冻人体卵巢组织移植到严重结合免疫的小鼠体内,腹腔内移植的ADSC装入纤维素中. 他们报告说,在TUNEL化验中,在ADSC装药组中检测到的口服卵泡少得多。 (29)在这项研究中,TUNEL分析显示,使用ADSC治疗的口腔细胞数量有所减少。 对睾丸I/R损伤也发表了一些类似的研究. 在对睾丸I/R受伤的大鼠进行的Moghimian等人的研究中,睾丸激素水平上升,接受维生素C治疗的5h睾丸激素组的MDA水平显著下降。 提交人的结论是,这可能是维生素C的抗氧化作用的结果。 (39) 在对接受肝素治疗的大鼠Shokuhi等人进行的研究中,肝素提高了GPx和SOD酶的血清水平,降低了睾丸组织中MDA的浓度。 此外,提交人说,hesperidin减少了Bax,提高了Bcl-2的表达水平。 他们还表明,细菌细胞中的鼠疫发病率明显下降。 提交人的结论是,这可能是Hesperidin的抗氧化作用的结果。 (40)在对Ameli等人用睾丸躯干进行的大鼠的研究中,躯干/脱鼠组的SOD、GPx和睾丸酮水平显著下降,而接受Tadalafil和verapamil的治疗组则有所上升。 Tadalafil和马鞭草可以保护睾丸组织损伤,并通过抑制睾丸躯干后的氧化应力来取代睾丸功能. (41)在目前的研究中,作者发现卵巢组织中的氧化应力在异血症后也有所增加. 此外,在第四组中,组织SOD活动量和吞噬细胞数量明显减少。 这些发现可能是ADSC抗氧化剂性质的结果,类似于上述研究.

除了证明干细胞疗效的调查外,肿瘤热带脂肪干细胞还被证明能支持肿瘤蒸发形成,增强卵巢癌进化能力. (42)Eterno等人对ADSC在乳腺癌中的致肿瘤潜力进行了调查,并报告说,ADSC不是致肿瘤的,但可能在有c-Met-表达的情况下具有致肿瘤潜力。 (43)因此,建议在良性妇科疾病中使用干细胞。

我们研究的功率可能通过使用较长的异血症持续时间和通过卵巢计数检测卵巢储备,抗弥勒氏激素,inhibin B, estradiool, 或fecundity 来提高. 然而,只有ADSC所赋予的群体的存在是我们研究的一个有力方面,即看ADSC对未受损卵巢的影响。

总之,如果在躯干后6小时内进行ADSC治疗,可能会通过降低蛋白质氧化和iNOS表达,缓解淋巴细胞的渗透,以及减少鼠标细胞的发生率,防止卵巢I/R损伤。 根据本研究的结果,ADSC的一个有希望的方面可能对人类研究有所减轻,最后,ADSC在卵巢躯干病例中可用作潜在的辅助治疗剂.

声明

作者贡献(CRediT)
所有作者对全部 14 项 CRediT 角色贡献均等(Conceptualization, Data curation, Formal analysis, Funding acquisition, Investigation, Methodology, Project administration, Resources, Software, Supervision, Validation, Visualization, Writing – original draft, Writing – review & editing)。
资助

Funding information was not reported in the published version of this article.

利益冲突
The authors declared no conflict of interest.
伦理批准
The Dokuz Eylül University Ethics Committee for Animal Research approved the animal protocol for this study (Approval no. 28/2015).
数据可用性
A data availability statement was not reported in the published version of this article.

参考文献 (43)

43 条参考文献中有 38 条已链接 DOI。

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Kasap B, Kasap S, Vatansever S, Kendirci R, Yilmaz O, Calisir M, et al. Protective Effects of Micro-Injected Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells on Ovarian Ischemia/Reperfusion Injury in Rats. Ulutas Med J. 2021;7(4):237-247. doi:10.5455/umj.20211019101154

Kasap, B., Kasap, S., Vatansever, S., Kendirci, R., Yilmaz, O., Calisir, M., Turkcu, U. O., Akin, M. N., Akbaba, E., & Turhan, N. O. (2021). Protective Effects of Micro-Injected Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells on Ovarian Ischemia/Reperfusion Injury in Rats. The Ulutas Medical Journal, 7(4), 237–247. https://doi.org/10.5455/umj.20211019101154

Kasap, B. et al. (2021) 'Protective Effects of Micro-Injected Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells on Ovarian Ischemia/Reperfusion Injury in Rats', The Ulutas Medical Journal, 7(4), pp. 237–247. doi: 10.5455/umj.20211019101154.

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