Paeonia Peregrina L. [Uşak-Itecik Tulip] Ekstraksiyonlar ve Phenolic ve Flavonoid bileşikler

Giriş Giriş

Bilim adamları, özellikle de içeriklerinde verimli kimyasal maddeler nedeniyle değil, aynı zamanda tıbbi amaçlar için kullanılan bitkiler işlevsel olabilir ve tedavi alternatifleri sunabilir.

Paeonia pregrina Bir bitkiye ait Paeoniaceae Aile, peony olarak, çeşitli türlerle ve yaprakları ve büyük, güzel, etkileyici petaller ile açıkça bilinir. Türkiye'de on iki türün büyüdüğü ve peony veya paeony olarak daha yaygın olarak biliniyor. Paeoniaceae Çeşitli türlerden oluşan aile, özellikle Akdeniz Bölgesi, Himalayalar ve Asya Bölgesi dahil olmak üzere dünyadaki birçok bölgede büyür. (1–3)P.Arietina, P.Daurica, P.Kesrouanensis, P.Masculasubsp. Bodurii, P.cf.Xkayae, Türkiye'deki bilinen 12 türü, P.Mascula subsp. Arasicola officinalis, P.Tenuifolia, P. Wittiana, P.Xkayae, P.(3). Çeşitli çalışmalarda, galoyl-paeoni-florin, biyolojik içerik Paeonia Çin tıbbında son derece yoğun olarak kullanılan bu, α-tocopherol'dan daha güçlü bir antioksidan aktiviteye sahiptir ve bu da α-tocopherol'dan daha güçlü bir antioksidan aktiviteye sahiptir. Paeonia Antiaggregant, anticonvulsant, anxiolytic, hipoglycemic, analgesic, sedative, anti-enflamatuar, anti-teoporotic etkiler ve özellikle kökleri antiaerjik ve anti-pietik olarak kullanılır (3–7)Buna ek olarak, Anadolu tıbbında öksürük ve ülser gibi hastalıklara karşı kullanılmış olduğu bildirildi. Türkiye'de yapılan yeni nesil çalışmalar da selamlayıcı asit içeriğini ve birçok biyolojik aktiviteyi vurgulamaktadır. (4–7).

Çalışmamızın konusuPaeonia PeregrinaYerel olarak “Uşak-Itecik Tulip” (Figure-1), Mayıs ve Haziran ayları arasında Kayağıl Köyü yakınlarındaki Itecik Hill'de 1200 metre yükseklikte büyümek ve şu anda Çevre ve Orman Bakanlığı tarafından korunmuştur. Belonging to belonging to belonging to belonging to Paeoniaceae Bir patates gibi aile ve şekillendirdi, zemin altında gömülü 25-75 cm vardır. Aynı zamanda bölgedeki “cannonball tulip” olarak da adlandırılır, çünkü yerel bir hikayeye göre, Türkiye Bağımsızlığı Savaşı sırasında bölgede kalan şehitlerin kanından renk aldı ve 15 gün boyunca yaşamayı başardı. (8, 9)Başka bir çalışmada da belirtildiği gibi, şu anda fitokimyasal özellikleri için incelenen pek çok bitki vardır ve Itecik tulip bunlardan biridir. (9).

Hastalıklara karşı antioksik aktivite yıllarca araştırma konusu olmuştur. Kimyasal esterlerin güçlü radikal scavending aktivitesine sahip olduğunu ancak bazı yan etkilere neden olabilir, böylece bitki bazlı doğal kaynakların daha az yan etkilere karşı bir eğilim var. (7, 9).

Bu çalışmanın amacı, “Itecik Tulip”un özgür radikal scavenating faaliyetlerini tespit etmektir ve şu anda hükümet tarafından korunan ve kendi mikrobiyal özelliklerini belirlemek ve Uşak bölgesine katkıda bulunmaktır.

Malzemeler ve Yöntemler

Bitkinin Getirilmesi

Plant Collection

Kurun Paeonia Peregrina L. bitkiler ve onların yaprakları (Figure 1-2), Kayağıl Uşak Köyü yakınlarında Itecik Hill'de büyür, orta Mayıs ayında Doğa Koruma ve Ulusal Parklar Müdürlüğü tarafından toplanmıştır. 2019. Tür, Prof. Dr. Serdar Gökhan Şenol tarafından Biyoloji, Ege Üniversitesi'nden alınmıştır. EGE43185 Ege Üniversitesi'nde (Izmir) olarak verildi. Herbarium örneği Biyoloji Bölümü'nde, Fen Fakültesi, Ege Üniversitesi'nde hazır ve depolanmıştır. Bitki şu anda Ege Üniversitesi'nin baryumunda korunmuştur.

Plant Material Ekstraksiyon

Uşak Üniversitesi Biyokimya laboratuvarında, Tıp Fakültesi uygun koşullar altında ve petaller, yaprakları ve şubeler birbirinden ayrıldı (Figure-3). Hayvanlar, terkler ve bu bitkiden gelen şubeler karışım ve havada kurutuldu. Bitkinin petalleri, yaprakları ve şubeleri 2,2-difenil-1-pixil-hidrazil'ı önceki raporda tarif edildiği gibi, ayrı olarak çıkarıldı. (10)Her birinden alıntılar hazır ve antioksidan aktivite, toplam rasyonal içerik analizi ve olic content assay aşağıdaki yöntemleri kullanarak belirlenir.

Deneysel Tasarım

Antioksi Aktivitesinin Belirlenmesi

DPPH (2,2-diphenyl-1-picrilhydrazyl) Assay

DPPH testi, her örnekteki ücretsiz radikal scavenging aktivitesini ölçmek için kullanılmıştır. petal ve 0.008 g yaprak örneklerinin 0.100 g'si 1 gram kuru petal ve yaprak ekstralarından elde edildi ve 100 μl DMSO'da (Ditil sulfoksit). Antioksit aktivitesi (Ücretsiz Radikal Scavenging Aktivitesi) örneklerin 2,2-diphenyl-1-picrilhydrazyl (DPPH) testi, bazı önceki değişikliklerde açıklandığı gibi (10)Her bir örneği 150μL 5850 μL DPPH çözümü ile karıştırılır ve bir saat boyunca 27°C'de tartışıldı. Absorbance, Shimadzu UV-1800 spektr fotometrede 515 nm'de ölçüldü. Ascorbik asit pozitif kontrol olarak kullanılmıştır.

DPPH radikal örnekleme yeteneği aşağıdaki formülü kullanarak hesaplanır:

Inhibition% = A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A_{boş boş boş boş boş} Örnek) / A_{boş boş boş boş boş}× 100

Total Flavonoid Content Analysis Total Derma content, alüminyum klorür renkliimetrik yöntemi kullanarak ölçümlendi. (11)50μl ekstraklar 10 ml test tüpüne döküldü, molun 950μl eklendi, 6400μl ısıtıldı ve sonra 300 μl% 5 NaNO_{2 2} Çözüm eklendi ve karışıktı. 300 μl% 10 AlCl_{3 3} Çözüm tekrar karışıma eklendi. 5 dakika sonra, 1 M NaOH çözümü 2000 μl eklendi ve toplam hacim 10 mL'ye kadar yapıldı. Mix 15 dakika boyunca dinlenmeye bırakılmıştı ve absorbance 510 nm'de Shumadzu UV- 1800 spektr fotometrede ölçülmekteydi. Catechin standart olarak kullanıldı ve toplam glokomin asit eşdeğeri olarak ifade edildi (CAE)/1 g kuru ağırlık başına.

Total Phenolic Content Assay

Türlerdeki Phenolic içerikler, Elzaawely ve Tawata tarafından değiştirilmiş Folin-Ciocalteu yöntemi kullanılarak belirlenir. (12). 7250 μl of deionized water, 500 μl ofsets and 250 μl of Folin-Ciocalteu reagent, 10 mL tüplere eklenmiş ve 5 dakika boyunca karanlık bir odada dinlenmeye bırakılmıştı. 2000 μl (7.5%) Nato_{2 2}CO CO CO CO_{3 3} thereon eklendi, toplam hacim 10 mL'ye kadar yapıldı ve karışım 30 dakika boyunca karanlık bir yerde oda sıcaklığında tartışıldı. Incubasyondan sonra, örneklerin absorbe değerleri, 765 nm dalga uzunluğunda Shumadzu UV-1800 spektrfofofofofofofofofofofophotometer'da ölçülmekteydi. Gallic asit standart olarak kullanıldı ve sonuçlar mg galic asit eşdeğer (GAE)/1 g kuru ağırlık (DW).

Antimikrobiyal Aktivite Testi

Test Substances ve Disk Diffüzyon Yönteminin Hazırlanması

0.100 g petal ve 0.008 g broşürleri 1 g kuru petallerden hazırlandı ve 100 μl DMSO'da ayrıldı. Sonuç örnekleri antimik aktivite deneyinde kullanılmıştır. Disk difüzyon yöntemi antimikrobiyal aktivite için kullanılmıştır. 30 μl petal ve 30 μl yaprak ekstraksiyonu da katı DMSO boş disklere absorbe edildi. Nutrient Broth ortalarında yetişen bakteriler, Nutrient Agar ve diskleri içeren petri yemeklerde yeniden motive edildi. Vancmisin, Chloramphenicol, Penicillin, Tetracycline ve Erythrmisin antibiyotikler pozitif kontrol olarak kullanıldı ve DMSO negatif kontrol olarak kullanıldı. Petri yemekleri 24 saat boyunca 37oC'de tartışıldı. İncubasyon sürecinin ardından, elde edilen bölge çapındakiler ölçüldü ve sonuçlar değerlendirildi.

Sonuçlar Sonuçlar Sonuçlar Sonuçlar

Itecik Tulip'in Antioksi aktivitesi Tablo-1'de sunulur, Total Flavonoid Content Analysis Kalibrasyon Curve of Itecik Tulip'in Graph 1'de toplam içerikli aktivitesi 26.22 mg CAE /g in petals. yaprak ekstrasındaki toplam felci içerik 3.16 mg GAE/g iken, evcil ekstraksiyonda toplam felci içerik 23.7 mg GAE/g idi. Itecik Tulip'ın antimikrobiyal Aktivitesi verildi.

Tartışma Tartışma Tartışma

Doğal olarak üretilen bitki bazlı doğal ürünler ve çok az yan etkilere sahip olarak bugün oksidatif stres ve oksidatif stres nedeniyle kullanılan sentetik ilaçların yan etkileri nedeniyle çok popüler. Bu ürünler sadece bir trend oldukları için dikkat etmiyor, aynı zamanda kimyasal aktivitelerinden dolayı da öyle. (9)Reaktif oksijen partikülleri denilen substances, canlı varlıklara büyük zarar verir, bu nedenle, serbest radikallerin ortadan kaldırılmasına karşı faaliyet, kullanılan bitki ekstralarının etkinliği açısından önemlidir. (7, 13, 14). Bugün çok sayıda bitki ve doğal olarak üretilen malzemeler kullanılıyor çünkü yaygın olarak bilinen ve çok sayıda hastalığa neden olan oksidatif serbest radikaller için bir tedavi alternatifidir.

pheochromocytoma'dan elde edilen nöroblastic hücre hatlarıyla yapılan bir çalışmada, gözlemlendi. Paeonia lactiflora oxidative stresi ve Hırtosis'i Hırt tarafından tedavi edebilir_{2 2}Ey_{2 2} Ve tedavide kullanılabilir (7)Mevcut çalışmada, Itecik tulip'in ücretsiz radikal scavenging aktivitesinin yanı sıra, olumlu kontrol grubundan daha düşük bulundu, yapraklarındakinden daha yüksek aktivite görüldü. Ayrıca başka bir çalışmada, kuru yaprakların kuru yapraklarının Paeonia suffruticosaÇin tıbbında sıklıkla kullanılan bir bitki, yüzyıllardır çeşitli tedavilerde kullanılmıştır ve yüksek miktarda fenol, glycosides ve monoterpene ve farmakolojik özellikleri incelenmelidir. (15). Kapsamlı bir araştırmanın sonuçlarına göre, toplam felci içerik Paeonia Batı Anadolu'da bulunan ekstralar 4.2 mg GAE / g iken toplam felci içerikti Paeonia Kuzeybatı Anadolu'da bulunan ekstralar 10.5 mg GAE / g (3)Çalışmamızda, petal ekstradaki toplam felci içerik 23.75 mg GAE/g iken toplam felci içerik 3.16 mg GAE / g idi. Orhan et al tarafından yapılan bir çalışmada, 12'nin kökleri Paeonia Türler kullanılmış ve tüm türlerdaki felsefi içerik, çalışmamızda kullanılan petal ekstradaki fenal içerikten daha düşük bulundu. (3)Diğer yandan, toplam içerik, evcil hayvanlarda 10.32 mg CAE / g olduğu tespit edildi ve 26.22 mg CAE / g in yaprakları. Kuru yaprakların biyokimyasal içerikleri mevcut çalışmada düşük olmasına rağmen, terk edilen içerik petallerden daha yüksekti. Başka bir çalışmada, bitkilerin içeriği ve antioksidan aktiviteleri korelasyonel edilir (13)Bu nedenle, çalışma konumuz Itecik tulip yapraklarının antioksidan aktivite ve radikal scavenging aktivitesi açısından etkili olabileceği sonucuna varılabilir.

Bir çalışmada pieoniflorin'in köklerinde bulduğu bildirildi Paeonia, Özellikle, antikonvulsant ve sense-enhancing karakteri vardır, deman tedavisinde kullanılır ve vasodilator etkisine yol açar ve metanol ekstraları hipercholesterolemik sıçanlarda kolesterol azaltır (16)Çeşitli çalışmalar da Paeonia'daki doymamış yağ asitlerinin yüksek miktarları olduğunu bildiriyor. (13)Bitkinin yağ asit oranını incelemedik, bu nedenle henüz doymamış yağ asiti olup olmadığını tespit etmedik. Ayrıca, bitkilerin kromozom sayıları bilgisinin bitkiler arasındaki ilişkiyi gözlemlemek ve bitkileri tarımsal olarak incelemek için önemlidir. (3)Bu yönleri açısından Itecik tulip'in de bizim için önemli.

Tesisin antimikrobiyal aktivitesini P. Aerouginosa mikroorganizmi bölgeye göre değerlendirdiğimizde, bitkinin petal ekstraksiyonu Vancmisin, Penicillin ve Erythrmisin ve 2 kat daha etkili oldu. P. Aeruginosa, nosocomial enfeksiyonlarında en yaygın mikro organizmadır ve birçok antibiyotike karşı dayanıklıdır. Araştırmalar ayrıca bazı ilaçlara genetik direnci olan bireylerin antipsieudomonal antibiyotiklere daha yüksek bir direnişe sahip olduklarını (tahlycosides, peniciins, cephalosporins, florinolon ve karbapenems) ve bu tür genlerin dağılımının izlenmesi gerektiğini önermektedir. Ayrıca, etkili bir antipsikoloji ilacı almaya başlamak için yaşam kurtarıcı olabilir, ancak bu bulaşıcı ajan hastaneleşme süresini uzatır ve yüksek mortalite oranına sahiptir. (17, 18)K. Pneumoniae, baskılanan bağışıklık sistemi ile bireylerde yoldaş enfeksiyonlar ve enfeksiyonlara neden olan başka bir mikroorganizmdir. (19–22)Mevcut çalışmada, Paeonia'nın petal ekstraksiyonu, Erythrmisin ile karşılaştırılarak Pneumonia'ya karşı 3 kat daha etkiliydi ve Penicillin ve Vancmisin ile kıyasla 2,5 kat daha etkiliydi. Bugün, P. Aeruginosa ve K. Pneumoniae'ye karşı direnişi önlemek için dar görüşlü mikroorganizmalara karşı bir eğilim olduğunu iddia ediyor. (18)Bu bakış açısından, Paeonia petallerini etkinliğini değerlendirmek ve tedavi alternatifi olarak düşünmek faydalı olabilir.

Çalışmamızın amacı, Itecik tulip'in antioksidan ve antimik özelliklerini incelemek, Uşak bölgesine yerli ve felci assays kullanarak incelemekti. Itecik tulip'un antioksidan aktivite ve radikal scavenging aktivitesini sergilediği gözlemlendi, P. Aeruginosa ve K. Pneumoniae'nin geliştirilmesini engellemek için dar görüşlü antibiyotiklere yönelik bir eğilim vardı. Buna ek olarak, bu bitkinin özelliklerini daha ayrıntılı olarak aramak ve kanser dokularında etkilerini incelemek için bir sonraki hedefimiz olacaktır. Ayrıca şu anda koruma altında olan bu bitkinin tanıtımına katkıda bulunarak ikinci hedefimizi elde ettik.