Antioxidant Capacity and Antimicrobial Activity of Paeonia Peregrina L. [Uşak- Itecik Tulip] Extracts and Its Phenolic and Flavonoid Compounds

مقدمة

ويستخدم العلماء الكثير من النباتات كمواد بحثية، لا سيما بسبب المواد الكيميائية الفعالة في محتواها فحسب، بل أيضاً لأن النباتات المستخدمة للأغراض الطبية يمكن أن تكون عاملة وتوفر بدائل للعلاج.

Paeonia pregrina هو مصنع ينتمي إلى Paeoniaceae العائلة معروفة علناً باسم الزهرة، مع أنواع مختلفة، ومعها أوراق، وبطاطس كبيرة وجميلة ومثيرة للإعجاب. It is reported that twelve species grow in Turkey and it is more commonly known as peony or paeony. Paeoniaceae الأسرة التي تتكون من أنواع متنوعة تنمو في مناطق عديدة حول العالم، ولا سيما منطقة البحر الأبيض المتوسط، وهيمالايا، وآسيا (1–3)P.Arietina, P.Daurica, P.Kesrouanensis, P.Masculasubsp. Bodurii, P.cf. Mascula subsp. Mascula, P.Mascula subsp., Arasicola officinalis, P.Peregrina, P.Tenuifolia, P. Witkaiana.(3)ويتضح في دراسات مختلفة أن المحتوى البيولوجي للمحتوى البيولوجي للمجلة غالويل - بايوني - فلورين Paeonia الذي يُستخدم بشكل مكثف جداً في الطب الصيني، له نشاط مضاد للأكسدة أقوى من الأوكسيد ألفا، وأن Paeonia وله آثار مضادة للانقراض، ومضادة للتكتل، وغامضة، وناقصة النسيج، ومرضية، ومضادة للالتهاب، ومضادة للالتهاب، ومضادة للالتهاب الرئوي، ولا سيما جذوره، تستخدم على أنها مضادة للخطر ومضادة للنسخ (3–7)وبالإضافة إلى ذلك، أفيد بأنه كان يستخدم ضد أمراض مثل السعال والقرح في طب الأناضول. كما تؤكد دراسات الجيل الجديد التي أجريت في تركيا على محتواها من حمض الجلالة والعديد من الأنشطة البيولوجية (4–7).

موضوع دراستناPaeonia Peregrinaومن المعروف محليا باسم " أوشاك - إيتيسيك توليب " )الشكل ١( أن ينمو بنفسه على ارتفاع ١٢٠٠ متر على تلة إيسيك بالقرب من قرية كاياغيل في أوشاك في الفترة ما بين أيار/مايو وحزيران/يونيه، وتحافظ عليها حاليا وزارة البيئة والغابات. يَعْملُ إلى Paeoniaceae العائلة و التي شكلت مثل البطاطا لديها أنبوب 2575 سنتيمتر مدفون تحت الأرض ويسمى أيضا " تمثال كرة المدفع " في المنطقة لأنه، وفقا لقصة محلية، أخذ لونه من دماء الشهداء الذين بقوا في المنطقة خلال حرب الاستقلال التركية وتمكنوا من العيش لمدة 15 يوما، ولهذا السبب يعيش لمدة أسبوعين تقريبا. (8, 9)كما ورد في دراسة أخرى، هناك العديد من النباتات التي تنمو في الأناضوليا والتي يجري بحثها حالياً فيما يتعلق بخواصها الفيزيائية، وهي واحدة من هذه النباتات. (9).

وكان نشاط مكافحة السموم ضد الأمراض موضوع بحث لسنوات. It is reported that chemical phenolics have strong radical scavenging activity but may cause some side effects, thus there is a tendency toward the use of plant-based natural resources with fewer side effects (7, 9).

والهدف من هذه الدراسة هو الكشف عن أنشطة " إيتيسيك توليب " المتطرفة الحرة وعن أوراقها، فضلا عن البوليسات الواردة في المصنع الذي تحتفظ به الحكومة حاليا ويعرف أنها تنمو بمفردها، لتحديد خصائصها المضادة للأكسدة والمضادة للأوبئة، والإسهام في تعزيز هذا المصنع الأصلي في منطقة أوشاك.

المواد والأساليب

اقتناء النباتات

جمع النباتات

جافة Paeonia Peregrina L. plants and their leaves (Figure 1-2), which grow on Itecik Hill near Kayağıl Village of Uşak, was collected by the Directorate of Nature Conservation and National Parks in mid-May. 2019 واتسمت هذه الأنواع بالبروفيسور الدكتور سيردار غوخان شينول من فصل علم الأحياء، جامعة إيج. وأعدت عينات هيربارو وأودعت في قسم علم الأحياء، كلية العلوم، جامعة إيج. The plant is currently preserved in the herbarium of Ege University.

استخراج المواد النباتية

وقد جُففت في مختبر الكيمياء الحيوية التابع لجامعة أوشاك، كلية الطب، في ظروف مناسبة، وفصلت عن بعضها البعض (الشكل 3). حيوانات التفريغ والأوراق والفروع المأخوذة من هذه النبتة تم مسحها بواسطة خلاط وجفت في الهواء The petals, leaves and branches of the plant were extracted separately by using 2,2-difenil-1-pixil-hidrazil as solvent as described in previous report (10)- تم إعداد مقتطفات من كل منها، كما تم تحديد النشاط المضاد للأكسدة، وإجراء تحليل كامل للمحتوىات النكهة، وإجراء تقييم للمحتوى الفلكي باستخدام الأساليب التالية.

التصميم التجريبي

Determination of Antioxidant Activity

DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) Assay

The DPPH test was used to measure the free radical scavenging activity in each sample. تم الحصول على 0.100 غرام من البنزين و 0.008 ميكروغرام من عينات الورق من 1 غرام من البنزين المجفف ومقتطفات من الورق وتم حلها في 100 ميكرول DMSO ( سلفوكسيد الميثيل). وحُدد النشاط المانع للتأثير (النشطة الخالية من الإشعاعات) من العينات باختبار ثنائي الفينيل - 1 - الإيبريل هيدرازيل، على النحو المبين في بعض التعديلات السابقة (10)١٥٠ ميلا من كل عينة كان مختلطا مع ٥٨٥٠ كيلو مترا من حل فيروس نقص المناعة البشرية/متلازمة نقص المناعة المكتسب )الإيدز( وحاضن في ٢٧ درجة مئوية لمدة ساعة. وقُسمت المسافات في مطياف مطياف شماديزو UV-1800 في 515 nm. وقد استخدم حمض الاسكوربيك كتحكم إيجابي.

وتحسب قدرة العينة المتطرفة على الاستغناء عنها باستخدام الصيغة التالية:

Inhibition % = [[[ ألف_فارغ - Sample] / A_فارغ× 100

مجموع محتوى الفلافونويد تم قياسه كميا باستخدام طريقة قياس كلوريد الألومنيوم (11)50 ميكرولت من المستخرجات صُبّت إلى 10 أمتار من الأنابيب الاختبارية، وأضيف 950 ميكرول من الميثانول، و 6400 ميكرول من الماء المهيون، ثم 300 ميكرول من 5 في المائة من النانو₂ وأضيف حل ومختلط. 300 ميكرول من 10% من الكحول₃ وأضيف الحل إلى الخليط ومختلط مرة أخرى. وبعد 5 دقائق من الحضانة، أضيفت 2000 ميكرول من حل ناو - هول، وشكل الحجم الإجمالي ما يصل إلى 10 ملليترات. The mixture was left to rest for 15 minutes and its absorbance was measured in Shumadzu UV- 1800 spectro photometer at 510 nm. واستُخدمت كاتشين كمحتوى قياسي، وأُعرب عن المحتوى الكلي للنكهات على أنه مكافئ لحامض الكتاتشين (CAE)/1 غرام لكل وزن جاف.

Total Phenolic Content Assay

تم تحديد محتويات الشرطة في المقتطفات باستخدام طريقة فولين - تشيوكلتو التي عدلها إلزاويلي وتواتا (12)٧٥٠ ميكرول من المياه المهينة، و ٥٠٠ ميكرول من المستخرجات، و ٢٥٠ ميكروغرام من مغسلة فولين - تشيوكالتو أضيفت إلى ١٠ أمتار من الأنابيب، مختلطة ومتروكة للراحة في غرفة مظلمة لمدة ٥ دقائق. 2000 ميكرول (7.5 في المائة) من نا₂CO₃ وأضيفت في هذا الصدد كمية إجمالية تصل إلى 10 ملليترات وتم احتواء المخلوط عند درجة حرارة الغرفة في مكان مظلم لمدة 30 دقيقة. After incubation, absorbance values of samples were measured in Shumadzu UV-1800 spectrophotometer at 765 nm wave length. واستُخدمت حمض الجاليك كمعيار وأُعرب عن نتائجه على أنه معادلة لحامض غاليك (GAE)/1 وزن جاف (DW).

Antimicrobial Activity Test

إعداد المواد الاختبارية وأسلوب التشهير

0.100 g petal and 0.008 g leaf extracts were prepared from 1 g of dried petals and leaves and dissolved in 100 chlorl DMSO. واستُخدمت العينات المسترجعة في تجربة أنشطة مكافحة الأوبئة. واستُخدمت طريقة نشر الأقراص في أنشطة مكافحة المخدرات. تم امتصاص 30 ميكروغرام من البنزين و30 ميكرول من الورق المستخرج وكذلك مذيبة من الدي إمسو في أقراص فارغة أما البكتيريا المزروعة في وسط بروت المغذيات فقد استرجعت في أطباق زرية تحتوي على أغار مغذية وأقراص تم استيعاب مواد الاختبار فيها. واستخدمت شركة Vancomycin, Chloramphenicol, Penicillin, Tetracycline and Erythromycin antibiotics كمكافحة إيجابية، واستُخدمت مادة DMSO كمكافحة سلبية. أطباق البترول تم حضنها في 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة وفي أعقاب عملية الحضانة، قُيِّمت سمات المناطق التي تم الحصول عليها وقُيِّمت النتائج.

النتائج

ويرد في الجدول 1 النشاط المانع للأكسدة الذي يقوم به إيتيك توليب في الجدول 1، وسلسلة تحليل المحتوى الكلي للعمدة المحتوية على اللافونية في الرسم البياني 1، واكتشف أن مجموع المحتوى الإجمالي يبلغ 26.22 ملغم من مادة CAE/g في الأوراق، و 10.32 ملغم من مادة CAE/g في البنزين. وكان المحتوى الشهيني الإجمالي في مقتطفات الورق 3.16 ملغم من اليورانيوم المستنفد/غرام، في حين كان المحتوى الكلي للثديين في مستخرج البنزين 23.7 ملغم من نصيب الفرد من الناتج المحلي الإجمالي/غرام. Antimicrobial Activity of Itecik Tulip is given in

المناقشة

فالمنتجات الطبيعية النباتية التي تُنتج بصورة طبيعية والتي تعتبر لها آثار جانبية قليلة جداً هي اليوم شائعة جداً بسبب الآثار الجانبية للمخدرات الاصطناعية المستخدمة في الإجهاد الأكسدة والأمراض الناجمة عن الإجهاد الأوكسي. وتحظى هذه المنتجات بالاهتمام ليس فقط لأنها اتجاه، بل أيضا بسبب نشاطها الكيميائي (9)المادة المسماة الجسيمات الأكسجينية الرجعية تسبب ضرراً كبيراً للكائنات الحية، ولذلك فإن النشاط ضد القضاء على الراديكاليات الحرة مهم من حيث فعالية المستخرجات النباتية المستخدمة (7, 13, 14)- يستخدم اليوم عدد كبير من النباتات والمواد المنتجة طبيعيا لأنها بديل علاجي للمتطرفين الحرين الأكسدة المعروفين على نطاق واسع والمعتقدين أنهم يسببون أمراضا عديدة.

ولوحظ في دراسة أجريت مع خطوط الخلايا العصبية المشتقة من ورم الفيكروموسيات أن Paeonia يمكن لـ (لكتيفلورا) علاج الإجهاد الأوكسي و الـ (بوبوتوسي) الذي يسببه (هـ)₂O₂ ويمكن استخدامها في العلاج (7)وفي هذه الدراسة، وعلى الرغم من أن نشاط إيتيك توليب المتطرف الحر كمؤشر للإجهاد الأكسدة قد تبين أنه أقل من مجموعة المراقبة الإيجابية، فقد شوهد نشاط أكبر في حيواناته الأليفة من الأوراق. It is also reported in another study that dried leaves of Paeonia suffruticosa' ' نبتة كثيرا ما تستخدم في الطب الصيني، تستخدم في مختلف العلاجات لقرون، وتحتوي على كميات كبيرة من الفينول والجليكوس والاحتكار، وينبغي التحقيق في خصائصها الصيدلانية (15)- وفقا لنتائج دراسة شاملة، المحتوى الكلي للثديين Paeonia المقتطفات التي عثر عليها في الأناضول الغربية بلغت 4.2 ملليغرام من الناتج المحلي الإجمالي/غرام في حين كان المحتوى الكلي للثديين Paeonia مقتطفات وجدت في شمال غرب الأناضول كانت 10.5 ملغم من اليورانيوم/الجواز (3)- وفي دراستنا، بلغ إجمالي المحتوى الشهيد في المستخرج النثري 23.75 ملغم من مادة GE/g، في حين بلغ إجمالي المحتوى الشهواني في مستخرج الورق 3.16 ملغم من مادة GE/g. In a study conducted by Orhan et al., the roots of 12 Paeonia تم استخدام الأنواع وتم العثور على المحتوى الشهواني في جميع الأنواع أقل من المحتوى الشهواني في مستخرجات الوقود المستخدمة في دراستنا (3)- ومن ناحية أخرى، اكتشف أن إجمالي محتوى الفلفونويد يبلغ 10.32 ملغم من مادة CAE/g في البنزين و 26.22 ملغم من طراز CAE/ g في الأوراق. وعلى الرغم من أن المحتويات الشهيرة للأوراق المجففة قد لوحظ أنها منخفضة في هذه الدراسة، فإن المحتوى الخافت في الأوراق كان أعلى منه في البتلات. In another study, flavonoid contents and antioxidant activities of plants are correlated (13)ومن ثم، يمكن الخلوص إلى أن موضوع دراستنا هو أن أوراق (إيتيك توليب) قد تكون فعالة من حيث النشاط المضاد للأكسدة والنشاط الجذري للخنق.

It is reported in a study that paeoniflorin found in the roots of (بايونيا) In particular, has anticonvulsant and sense-enhancing character, is used in dementia treatment and induces vasodilator effect and its metanol extract reduces cholesterol in hypercholesterolemic rats (16)وتشير عدة دراسات أيضا إلى وجود كميات كبيرة من حمض الدهون غير المشبع في بيونيا (13)ولم نحقق في نسبة حمض الدهون في المصنع، وبالتالي لم نكتشف بعد ما إذا كان يحتوي أم لا على حمض دهون غير مشبع. It is also stated that knowledge of chromosome counts of plants is important for observation relationship between plants and examining the plants agriculturally (3)كما أن تقييم إيتيسيك توليب من حيث هذه الجوانب مهم بالنسبة لنا.

وعندما قيّمنا نشاط المصنع المضاد للأوبئة ضد الكائنات المجهرية P. Aerouginosa، وفقا لمسميات المنطقة، كان استخراج البنزين من المصنع أكثر فعالية ثلاث مرات بالمقارنة مع فانكومسين و Penicillin وErythromycin ومرتان أكثر فعالية بالمقارنة مع Tetracycline. P. Aeruginosa is the most common micro organism in nosocomial infections and is resistant to many antibiotics. وتشير الدراسات أيضاً إلى أن الأفراد الذين يعانون من مقاومة جينية لبعض العقاقير لديهم قدرة أكبر على مقاومة المضادات الحيوية المضادة للفيديومون (النظريات المنجلية، والبنسلين، والسفالوسبورين، والفلوروكينولون، والنجارة) وإلى وجوب رصد توزيع هذه الجينات. وقد يكون أيضا توفير الحياة للبدء في الحصول على أدوية مضادة للفيديونا على الرغم من أن هذا الوكيل المعدي يطيل فترة العلاج في المستشفيات ويرتفع معدل الوفيات. (17, 18)K. Pneumoniae is another microorganism known to cause noso comial infections and infection in individuals with suppressed immune system very frequent (19–22)- وفي هذه الدراسة، كان المستخرج النثري لبايونيا أكثر فعالية ثلاث مرات ضد الالتهاب الرئوي بالمقارنة مع إريثرومسين وحوالي ٢,٥ مرة بالمقارنة مع البنسيلين وفانكومسين. It is suggested that there is a tendency toward narrow-spectrum antibiotics to prevent developing resistance to P. Aeruginosa and K. Pneumoniae which are still two of the feared nosocomial microorganisms today (18)ومن وجهة النظر هذه، قد يكون من المفيد مقارنة حيوانات " باليونيا " بمضادات حيوية أكثر لتقييم فعاليتها والنظر فيها كبديل للعلاج.

وكان الهدف من دراستنا هو دراسة الخصائص المانعة للأكسدة والعقاقير المضادة للدبابات التي تخص إيتيك تولي، الذي ينتمي إلى منطقة أوشاك، عن طريق استخدام مقالات عن الفلفونويد والشهيون. It was observed that Itecik tulip leaves exhibited antioxidant activity and radical scavenging activity, there was a tendency toward narrow-spectrum antibiotics to prevent developing resistance to P. Aeruginosa and K. Pneumoniae and a more comprehensive study should be conducted to assess the efficacy of this plant. وبالإضافة إلى ذلك، سيكون هدفنا التالي توسيع نطاق دراستنا للنظر في خصائص هذا المصنع بمزيد من التفصيل وفحص آثاره على الأنسجة السرطانية. ونعتقد أيضا أننا حققنا هدفنا الثاني بالإسهام في تعزيز هذا المصنع الذي يجري حفظه حاليا.