INOS Gene Rs2297518 Polymorphism Increases Risk in Male Patients with Acute Pancreatitis

مقدمة

إن التهاب الكبدي الحادة هو صورة سريرية تؤدي إلى انعكاسات ومضاعفات محلية وإقليمية ومنهجية في الكائنات الحية التي تتميز بانزيمات الهضم، التي تكون عادة غير نشطة في البنكرياس، والتي تنشط بعوامل إيثانولوجية، وتحفر الأنسجة الفلكية والأنسجة المحيطة بها، ونتيجة لذلك، تطور التهاب واسع النطاق (1)(ج) تشخيص حالة التهاب الكبد الحاد في ندوة أتلانتا في عام 2012، عندما كان 1) ألم البطن متوافقاً مع المرض، و2) ارتفاع مستويات النسل أو الليباز أكثر من ثلاث مرات من القيمة العادية، و3) واثنين من نتائج التصوير البطني المميزة الثلاثة.

According to this symposium, acute pancreatitis is divided into three groups as mild, moderate and severe pancreatitis. يُنظر إلى التهاب الكبد الحاد على أنه 80 إلى 85 في المائة من المهدئات المتوسطة، 15 إلى 20 في المائة (2)وعلى الرغم من اختلاف المقاييس بين البلدان، فإن الأحجار الكريمة مسؤولة عن 40 إلى 70 في المائة من حالات منع الحمل والكحول مسؤولة عن 25 إلى 35 في المائة (3)- مع إدراك أن الالتهاب والاكتئاب يؤديان دورا في المسببات المرضية للآداب، زادت الدراسات في هذا الاتجاه في السنوات الأخيرة. While short-term and low amount of NO synthered by the effect of endothelial NOS and neural NOS is secreted in normal and pathological events, sometimes long-term and excessive amount of NO is secreted by INOS due to cytokine stimulation in cases such as endotoxemia and burns (4)(أ) لا يوجد أي أثر ناجم عن المعهد الوطني للإحصاء يؤدي دوراً في الظروف المرضية مثل الالتهاب، وإصابة الالتهاب الرئوي، والصدمة الدماغية، والاضطرابات العصبية، والاضطرابات الناجمة عن تقلص القلب، وارتفاع ضغط الدم، والسكري، وأمراض المناعة الذاتية، والسرطان، والأمراض العصبية، حيث يسهم إنتاج أكسيد النيتريك المفرط. الحد من ال NO له آثار مفيدة على الكائن (5, 6)- لا يُنتج بشكل مفرط عن طريق المعهد خلال هذه العملية ويزيد من حدة التهاب الأعماق. The INOS gene polymorphism is situated on the long arm of chromosome 17 (17q) (7):: تؤدي تعددية البوليمورفيا الجيني في المعهد دوراً هاماً في مسببات أمراض كثيرة (8–10)- وعلى حد علمنا، لا توجد سوى دراسة واحدة في الأدبيات التي تدرس العلاقة بين التعددية في البوليمورفيا والتهاب الكبد الحاد، وهي دراسة حددت التعددية البوليمورفية في المعهد الوطني للتوحيد القياسي باعتبارها عاملا محتملا من عوامل الخطر بالنسبة للبروتوكول الاختياري. (11) ونرى أن من الضروري إجراء مزيد من الدراسات لتحديد ما إذا كان التعددية البوليمورفية لجين المعهد يمكن أن تكون عاملا من عوامل الخطر بالنسبة للبروتوكول الاختياري.

The study aimed to investigate whether INOS gene rs2297518 polymorphism contributes to the risk in patients with acute pancreatitis and its relationship with disease severity.

المواد والأساليب

عدد المرضى

In this study, peripheral blood collected from 99 patients diagnosed clinically, laboratory, and radiologically with acute pancreatitis and 99 healthy individuals 188 individuals who applied to the University Hospital Emergency Service and Gastroenterology Department were used as material. وشُكلت مجموعتان تجريبيتان مختلفتان هما: المجموعة التي تم تشخيصها بالتهاب الكبدي الحاد ومجموعة المراقبة المكونة من أفراد صحيين. تم الحصول على موافقة لجنة الأخلاقيات الجامعية للدراسة (تاريخ اتخاذ القرار: 26/15؛ المقرر: 24). وتم جمع عينة الدم الخاصة بالدراسة ومراقبة الأفراد المشاركين في البحث على أساس طوعي في إطار القواعد الأخلاقية. وأُبلغ المتطوعون في كل من مجموعات المرضى والتحكم بوضوح عن الغرض من الدراسة ومضمونها قبل المشاركة في الدراسة.

Probe and Master Mix used in Real Time-PCR وقد جُمعت ملليمترين من الدم البيطري من المجموعات المدرجة في الدراسة إلى أنبوب فراغ (BD Vacutainer, UK) تحتوي على 0.5 من الغيلان (M) ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) (5.4 ملغم). تم تخزين الدم الفاصل من المرضى والتحكم في الأشخاص عند درجة الحرارة +4 درجة مئوية حتى عزلة الحمض النووي. تم عزل الحمض النووي الجنوميك عن الدم البيطري و تم تخزين الحمض النووي المعزول في 80 درجة مئوية حتى يوم الدراسة In the real-time PCR reaction using LightCycler 480 (Roche), single nucleotide polymorphism was determined by TaqManSNP Genotyping Universal Master Mix II kit purchased from Life Technology. واستُخدمت المساجين المسمّاة بـ " VIC " و " FAM dye " لتحديد جميع جوانب البوليمورفيا (A/G) (7, 12, 13).

Determination of INOS Gene Polymorphism Alleles and Genotypes by End Point Analysis As a result of real-time PCR using LightCycler 480 (Roche) tool, the End Point Analysis was used to determine rs2297518 polymorphism allele and genotypes.

التحليل الإحصائي

وأُجري تحليل إحصائي للبيانات باستخدام مجموعة البرمجيات من طراز IBM SPSS 20 الخاصة ببرنامج Microsoft Windows. وأُفيد بأن الإحصاءات الوصفية ترددات ونسب مئوية (%) للمتغيرات القاطعة، وكانحراف عن المتغيرات المستمرة (أو متوسط الحد الأقصى عند الاقتضاء). The normality of continuous variables between groups was assessed using the Kolmogorov-Smirnov. وفيما يتعلق بالمقارنات، استُخدمت وكالة أنوفا في اتجاه واحد في متغيرات موزعة عادة، في حين طُبقت اختبارات غير متماثلة بين مان وهيتيني وكروسكال - فاليس لمتغيرات مستمرة غير موزعة بشكل عادي. واستُخدمت إحصاءات الاختبارات المتعلقة بالزجاجات المائية لمقارنة المتغيرات القاطعة. The impact of INOS gene rs2297518 polymorphism genotypes on disease risk was evaluated using logisticalistic regression.

النتائج

The etiology was as follows: cholelithiasis in 55 (55.6%), unknown in 12 (12.1%), post-ERCP in 11 (11.1%), hyperlipidemia in 9 (9.1%), ductal occlusion in 6 (6.1%), both cholelithiasis and post-ERCP in 3 (3%), drug-related in 2%), and alcohol-related in 1%) patient. وكان من بين المشاركين 61 امرأة (61.6 في المائة) و 38 (38.4 في المائة) من الرجال، وكان متوسط العمر 54 سنة (18-95). وكان عدد الأفراد الذين دخنوا 17 (17.2 في المائة)، وكان عدد الأفراد الذين استهلكوا الكحول 4 أفراد (4 في المائة) (الجدول 1). G allele frequency of the INOS gene rs2297518 polymorphism was 72.2% in the patient group, whereas the G allele frequency was 80.3% in the healthy control group. The A allele frequency was 27.8% in the patient group, compared to 19.7% in the healthy group. وعند مقارنة المجموعات بترددات العجلات، لم يلاحظ أي فرق (ع= 0.06). وكان التردد النمطي للبوليمورفيا في مجموعة المرضى هو 54.5 في المائة بالنسبة لنموذج GG و10.1 في المائة بالنسبة لنموذج " AA genotype " ، في حين أن تردد جينوم نوع GG في الصحة هو 64.6 في المائة و4.1 في المائة. ولم يعثر على أي فرق بين المجموعتين من حيث تردد الجنين (الجدول 2).

The frequency of alleles and genotypes of the INOS rs2297518 polymorphism according to gender in men who had acute pancreatitis, compared to the control, was higher in those carrying the A allele, and A allele increased the disease risk 2.41 times (p=0.03). وزاد من خطر الإصابة بالأمراض بمقدار 2.90 مرة في الرجال (p=0.05). ولم تظهر أي نماذج أخرى أثرا على الخطر. وفي صفوف النساء، لم تكن الزيادة في مخاطر الأمراض الناجمة عن الأوبئة والنماذج الجينية كبيرة (الجدول 3).

المناقشة

According to the present study, the probability of developing AP may be higher in males carrying the INOS gene rs2297518 A allele and the GA genotype.

وأبلغ وانغ ز. وآخرون عن النتائج التي توصلوا إليها من دراسة عن حالة السكان الصينيين، وتحليل 299 حالة و280 حالة سباحة في مقاطعتي لياوينغ وجانغسو. They found that the INOS gene GA+A genotype (rs229758, G.A) was significantly associated with an increased susceptibility to septic shock in sepsis patients studied 13 single-nucleotide changes from 10 genes involved in oxidative stress to explore the relationship between non-Hodgkin lymphoma from Liaoning when compared to the GG genotype. However, this genotype was not linked to disease susceptibility in patients from Jiangsu (14)Wang SS et al. (NHL) and oxidative stress. وشملت هذه الدراسة 1172 مريضا من مرضى فيروس نقص المناعة البشرية و 982 من الضوابط الصحية. وزاد التعددية البوليمورفية في الجيل الثالث من الجيل الثاني من البوليمورفيا من خطر الإصابة بالمرض بمقدار 2.2 مرة في مجموعة الجيل الثالث من القانون الإنساني الوطني، وهو أمر هام. وارتُبطت بمخاطرة أعلى بواقع 2.1 ضعفاً من اللمفاوية B-cell. وعلى الرغم من أن الخطر اقتُرح زيادة بنسبة 3.7 مرات في اللمفاوية T-cell، فإنه ليس كبيراً. However, individuals with the GA+A genotype had a 1.8- fold increased risk of T-cell lymphoma. When analyzing NHL subtypes and INOS rs2297518 polymorphism, the AA genotype raised the disease risk by 3.3 times in diffuse large B-cell lymphoma. In follicular lymphoma, the risk of disease was found to be 2.6 times higher in those with the AA genotype compared with those with the GG+GA genotype (15).

Dhillon S.S. et al examined the relationship between INOSpolymorphism and inflammatory bael disease in their meta-analysis. In their analysis, 159 very early-onset inflammatory volumeel disease (VEO-IBD) (91 Crohn’s and 68 ulcerative colitis) and 913 healthy individuals diagnosed under the age of 10 according to the Montreal classification Paris modification were included in the first study and 17 INOS gene polymorphisms were studied. وكانت البوليمورفيزمات في مرضى VEO-IBD ذات أهمية مقارنة بالمكافحة. rs2297518 polymorphism was associated with diffuse pancolitis in IBD patients under 6 years of age. The second study included 153 VEO-IBD patients and 480 healthy individuals. The INOS rs2297518 polymorphism was significant in VEO-IBD patients compared to the healthy group. In the third study, 498 patients with IBD (351 Crohn and 147 ulcerative colitis) aged 11-17 years and 918 patients with IBD (419 Crohn’s and 499 ulcerative colitis) patients over 17 years of age were included in the study. INOS rs2297518 polymorphism was significant in ulcerative colitis patients aged 11-17 years (10).

واستكشف جيانغ جي وآخرون عن وجود أطفال مع جماعة هينوتش - شونلين لتطوير النيفريتيس في إطار جماعة هان الصينية. The study involved 532 healthy and 513 children diagnosed with HSP. The investigation focused on a penta-nucleotide repeat (CCTTT)n in the INOS gene promoter and 10 operational single-nucleotide polymorphisms (SNPs). The results suggested a nominal association between the allelic and genotypic frequencies of the rs3729508 polymorphism and susceptibility to the HSP. Furthermore, a significant difference was found in the distribution of the INOS gene (CCTTT) 12 repeat and rs2297518 alleles between children with HSP who developed nephritis and those who did not. وعلى وجه التحديد، كان الأطفال الذين يعانون من الالتهاب النيفوري أعلى بكثير من حالات تكرار الـ 12 وعجلة واحدة من الجرعة 2297518 بالمقارنة مع أولئك الذين لا يحملون النيفريتيس (16).

وحقق أوزان غ وآخرون في العلاقة بين جينات المعهد الوطني للاستقلال الجوي والتهاب الكبد الحاد. وشملت الدراسة 93 فردا تشخيصهم بالاختبار الحاد و 60 من الضوابط الصحية. The INOS gene rs2297518 polymorphism was found to be notably associated with the patient group in comparison to the healthy. It was reported that the presence of the rs2297518 G.A variant increased the risk of the disease by 2.88 times. ومن المثير للاهتمام أنه لم يتم اكتشاف أي نوع من rs2297518 GG في مجموعة المراقبة. وبناء على ذلك، اقترح الباحثون أن تكون البوليمورفية البوليمورفية في المعهد الوطني للإحصاء بمثابة علامة بيولوجية للتهاب الكبدي الحاد (11)- لم يعثر على أي ارتباط هام بين شدة الأمراض وبين rs2297518 البوليمورفيا النمطي (GG, GA, AA). However, a significant correlation was found between disease severity and CRP, albumin and neutrophil/lymphocyte ratio (p0.0001, p0.001, p=0.017, respectively). No, generated through INOS expression, contributes to inflammatory process. Auto-imunity, tumor development and increases the severity of inflammatory diseases. وعلى الرغم من أن العلاقة بين تطور التهاب الكبد الحاد وتعددية الصدريات غير هامة، فإن أولئك الذين يعانون من داء الألي والنموذج الجنيني للتحالف في الذكور يزيدون من خطر الإصابة بهذا المرض. In studies conducted in different populations for different types of disease those carrying INOS gene polymorphism A allele have a higher risk of disease (10, 14–18).

أهم قيودنا كانت العدد الصغير inOS polymorphism A allies may be a risk factor for AP in women if the number of patients would increase. In our study, it was not noted at what time the patients applied to the hospital after abdominal pain started. وفي وقت سابق، كان القبول في المستشفى، ناهيك عن شدة ومضاعفات الطلب.

خاتمة

Males with INOS rs2297518 polymorphism A allele and GA genotype was identified as a risk factor for AP. وينبغي متابعتها عن كثب مع الذكور الذين يحملون هذه التعددية الجينية.