The Ulutas Medical Journal p-ISSN 2149-0430 e-ISSN 2149-388X

The Ulutas Medical Journal · ISSN 2149-0430 (basılı), 2149-388X (çevrimiçi) · https://www.ulutasmedicaljournal.com/?mno=262966

Özgün Araştırma · Açık erişim

C677T Gen Polymorphism in Male Infertility

Başlık, özet ve tam metin makine çevirisidir. İngilizce aslı

  • Papitha P Anand1
  • Vijaya Anand Arumugam1
  • Chandra R Samuel2
  1. Department of Human Genetics and Molecular Biology, Bharathiar University, India ROR
  2. Department of Genetics, University of Madras, Taramani, Chennai, India ROR
PDF indir (218.1 KB) Nasıl atıf yapılır doi:10.5455/umj.20170402052343

Özet

Arka plan: Mpidtetrahidrofite reductase, folate metabolizma ve DNA tilasyonda önemli bir rol oynayan önemli bir enzimdir. Bu çalışmanın amacı MTHFR C677T polimorphism in in infertile men analiz etmekti. Çalışma Tasarımı: Kan örnekleri 58 infertil erkekten toplandı ve 55 kontrol konusu verimli oldu. C677T mutasyon analizi, Polimerase zincir reaksiyonu-restriksiyon parça uzunluğu polimorphism (PCR-RFLP) yöntemi tarafından yapıldı. Sonuçlar: Şu anki çalışma, 23 Homozygous CC, 28 heterozygous CT, 7 TT infertil erkeklerde bulundu, kontrolde tüm varyasyonlar 38 Homozygous CC, 17 heterozygous CT, ancak homozygous TT bulundu. Sonuç: Sonuç olarak, Genotypes ve allele frekansı infertile hastalarda ve kontrollerde bulundu, ancak tümele sadece infertil erkeklerde bulundu. Homozygous TT sadece azoospermia infertile erkeklerde gözlemlendi, ancak heterozygous CT hem oligozoospermia hem de azoospermia konularında bulundu. Çalışma çok sayıda örnekle uzatılmalıdır.

Anahtar kelimeler

Tam metin

Tam metnin makine çevirisidir; geçerli sürüm İngilizce asıldır. İngilizce aslı

Giriş Giriş

Folic asit metabolizması, genomun bütünlüğü ve istikrarı için önemlidir, çünkü hata ücretsiz DNA sentezinde önemli bir rol oynar, DNA tilasyon modeli ve onarımı (1)Bu nedenle, folate alımı veya polimorphism (s) in folate yolu enzimleri aberrant DNA sentez ve metilasyon ile sonuçlanabilir. Mpidtetrahidrofite reductase (MTHFR) methionine ve folate metabolizmanın önemli bir enzimidir, DNA sentez ve metilasyon için önemli bir yardım. MTHFR, methionine oluşturmak için methionine veren 5 Metil tetrahidrofate'ye 5,10-m ESP tetrahidrasyonu azaltır. Methionine sonunda DNA tilasyon için ‘til’ bağışçı olarak hareket eden S-adenosyl methionine'ye dönüştürülür. (2)Ayrıca, uracil'i kendimine değiştirerek DNA sentezine karışan jantin (3). Bir farenin diğer organlardan daha yetişkin testlerinde, MTHFR'nin aktivitesi yüksek, spermatogenesissississis'teki rolünü temsil ediyor. (4, 5)Son araştırma, spermatogenez ve doğurganlıkda önemli rol oynayan çeşitli genlerin epigenetik düzenlemelerini belirledi. (6)Bu nedenle, MTHFR genindeki değişiklikler spermatogenez ve önceden belirlenmiş taşıyıcıların infertilite sürecini değiştirebilir. (7, 8).

MTHFR geninin insandaki uzunluğu 20 kb (20,336 bp) ve 1p36.3 (OMIM 607093), 11 exons sahip 11 exons (9)MTHFR'de 40'tan fazla polimorfizm tespit edildi, ancak en şiddetli ve klinik olarak önemli ortak varyantlar C677T in exon 4 and A1298C in exon 7 but most common are C677T of MTHFR geninin bu enzimin aktivitesini etkileyen tespit edilmiştir. (10–15). C677T varyantı, rs1801133) ve MTHFR'nin şiddetli şekli olarak en yaygın olanıdır. (16–21). Bu alt kurum, MTHFR özel aktivitelerini azalttı ve termodiability artırıldı. (22).

Homozygous T677T varyantı, kalan aktivitenin% 30'u ve heterozygous C677T varyantının C677C varyantına kıyasla% 70'i var. (23)Bu alt kurum, homosisteine ve düşük plazma folate seviyesinde de sonuçlar verir. C677T polimorphism sıklığı çevresel ve etnik yerle farklıdır (24)MTHFR polimorphism ile ilgili düşük folate seviyesinin DNA ve RNA moleküllerinin sentezlenmesi nedeniyle infertilite nedeni olacağını tavsiye edilmiştir. (4, 15).

spermin sonlandırılması folic asit ve çinko sulfate takviyesine göre artırılabilir, bu aynı zamanda bu yolun spermatogenesississississisozisyonunda önemini göstermektedir. (14)Bu aynı zamanda, 5aza deoxy cytidine tarafından düşük metilasyon uyarısını incelemekle desteklenmektedir, bu da spermatozoa'nın spermatositlerine göre farklılaşmalarını engelleyerek murine modelinde desteklemektedir. (25)Bu nedenle C677T polimorphism analizi, tüm varyantlar ve erkek infertilite arasındaki ilişkiyi elucidate için önemlidir.

Yöntemoloji

Genom DNA, hastaların periferik kanından çıkarıldı ve LOS-coform-isoamyl yöntemi kullanılarak örnekler kontrol edildi. (26, 27). Isolated DNA, termomixer yardımıyla 1x (işlev) TE tampon olarak çözüldü. DNA'nın niceliği ve kalitesi kontrolleri, spektrfofofofometriye (Nanodrop yöntemine) tabi olarak gerçekleştirilmiştir. nm asit örneği 260 nm ve 280 nm'de Nanodrop Spectrophotometer (Thermo Scientific, Almanya).

Saf DNA bir260/A280 ≥1.8 ila 2. <1.8 değeri protein ve fendi-nasyon anlamına gelir. >2 değeri RNA kirletici-nasyon olasılığını gösterir. Ayrıca, genomik DNA'nın bütünlüğü onu% 0.8'de birgarose jelinde çalıştırarak değerlendirildi. PCR, DNA 2μl'den oluşan 20 μl'nin toplam reaksiyon hacminde gerçekleştirildi, ADW (autoklavun distilled su) 7.6μl, forward astar (59CATC CCTATTGGCAGGTTACCC 0.2μl, ters (59 GGGAAGAACTCAGCGAAC TCAG39) (28, 29) 0.2μl, mastermix 10μl. PCR bisiklet Roch gradient PCR'de yapıldı. PCR amplifikasyon koşulları on dakika boyunca 95°C'de denaturasyona dahil edildi ve sonra 30 saniye boyunca 95°C'de 35°C'de 30 saniye boyunca eklenme ve 72 °C'de 30 °C'de polimerleşmenin son aşaması 7 dakika boyunca. Kolaylaştırmadan sonra, Hinf'in 0,5μl'ye eklenen bir kısıtlama enzimi olarak ve 4 saat boyunca tuttu. Hemen 4 saat sonra vial 80°C'de su banyosuna transfer edildi ve 20 dakika boyunca tuttu. Son olarak ürün birgarose jel elektroforezis% 3'te çalıştırıldı. jel görüntüsü UV transilluminater kullanılarak görüldü.

Sonuçlar Sonuçlar Sonuçlar Sonuçlar

23 Homozygous CC, 28 heterozygous CT, 7 TT infertil erkeklerde bulundu, kontrolde tüm varyasyonlar 38 Homozygous CC, 17 heterozygous CT, ancak kontrol örneklerinde homozygous TT bulunamadı. homozygous TT'nin tüm varyasyonu, azoospermia ve oligozoospermia kategorisine ait olan 7 infertilite örneği bulundu ve oligozoospermia'ya ait 28 heterozygous CT bulundu.

Şekil 1: Gel elektroforesi RFLP gösteriyor. C1 ve C2 kon-fazlar; MI1'in MI10'a erkek bebek örnekleridir; M-50bp moleküler işaret.
Figure 1. Gel elektroforesis RFLP gösteriyor. C1 ve C2 kon-fazlar; MI1'in MI10'a erkek bebek örnekleridir; M-50bp moleküler işaret.

Bu sonuçlar daha önce yapılan çalışmalarda meta-analiz tarafından da desteklendi. Çalışmamızın gözlemleri, özellikle de Zhu ve meslektaşları tarafından bildirilen meta-analiz çalışması için çelişkili sonuçları rapor eden iki önceki çalışmada ilginç hale gelmektedir. Onların sonuçları MTHFR C677T polimorphism ve erkek infertilitesi arasındaki ilişkiyi ortaya çıkardı. Ek olarak, MTHFR C677T, her genetik modelde azoospermia riski ile bağlantılıydı. Bu arada, oligoasthenotertozoospermia (OAT), genetik modellerin çoğunda bulundu. (30)Bir başka meta analizi, MTHFR C677T polimorfizminin erkek infertilitesi ile birlikte 26 çalışma içeren bir başka analiz çalışması, MTHFR C677T polimorphism'in erkek infertilite riski ile güçlü bir birliği olduğu sonucuna vardı. (31)Ayrıca, gübre olmayan erkeklerin 360'ı dahil eden bir çalışma ve MTHFR C677T ile azoospermia (32).

Sonuç Sonuç Sonuç

Genotypes ve allele frekansı normal konularla daha yüksek karşılaştırmalı olarak bulundu. O zamandan beri, MTHFR gen spermatogenesis yönetmeliğinde önemli bir rol oynar, tüm modlar erkek infertilitesinde ortaya çıkan süreci rahatsız edebilir. Ancak, çok sayıda örnek, iyi tasarlanmış ve yüksek kaliteli epidemiyolojik çalışmalar MTHFR C677T polimorphism ve erkek infertilite arasındaki ilişkiyi doğrulamak için gerekli olacaktır.

Beyanlar

Yazar katkıları (CRediT)
Tüm yazarlar 14 CRediT rolünün tamamına eşit katkıda bulunmuştur (Conceptualization, Data curation, Formal analysis, Funding acquisition, Investigation, Methodology, Project administration, Resources, Software, Supervision, Validation, Visualization, Writing – original draft, Writing – review & editing).
Fon desteği

Funding information was not reported in the published version of this article.

Çıkar çatışması
A conflict of interest statement was not reported in the published version of this article.
Etik kurul onayı
Ethics approval details were not reported in the published version of this article.
Veri erişilebilirliği
A data availability statement was not reported in the published version of this article.

Kaynaklar (32)

32 kaynağın 30 tanesi DOI bağlantılı.

  1. Ravel C, Chantot-Bastaraud S, Chalmey C, Barreiro L, Aknin -Seifer I, et al. Lack of association between genetic polymorphisms in enzymes associated with folate metabolism and unexplained reduced sperm counts. Plos One 4: e6540. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  2. A ZC, Yang Y, Zhang SZ, Li N, Zhang W. Single nucleotide polymorphism 677C.T in the methylenetetrahydrofolate reductase gene might be a genetic risk factor for infertility for Chinese men with azoospermia or severe oligozoospermia. Asian J Androl 9: 57–62. 3. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  3. Lee HC, Jeong YM, Lee SH, Cha KY, Song SH, et al. Association study of four polymorphisms in three folate-related enzyme genes with non- obstructive male infertility. Hum Reprod 21: 3162–3170. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  4. Dhillon VS, Shahid M, Husain SA. Associations of MTHFR DNMT3b 4977bp deletion in mtDNA and GSTM1 deletion, and aberrant CpG island hypermethylation of GSTM1 in non-obstructive Infertility in Indian men. Mol Hum Reprod 13: 213–222. 5. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  5. Chen Z, Karaplis AC, Ackerman SL, Pogribny IP, Melnyk S, et al. Mice deficient in methylenetethrahydrofolate reductase exhibit hyperhomocysteinemia and decreased methylation capacity, with neuropathology and aortic lipid deposition. Hum Mol Genet 10: 433–443. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  6. Minocherhomji S, Madon PF, Parikh FR. Epigenetic regulatory mechanisms associated with infertility. Obstet Gynecol Int pii. 198709 p. MTHFR C677T Polymorphism In Male Infertility Papitha P Anand, et al. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  7. Khazamipour N, Noruzinia M, Fatehmanesh P, Keyhanee M, Pujol P. MTHFR promoter hypermethylation in testicular biopsies of patients with nonobstructive azoospermia: the role of epigenetics in male infertility. Hum Reprod 24: 2361–2364. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  8. Singh K, Singh SK, Raman R. MTHFR A1298C polymorphism and idiopathic male infertility. J Postgrad Med 56: 267–269. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  9. Rai V, Yadav U, Kumar P. Prevalence of methylenetetrahydrofolate reductase C677T polymorphism in eastern Uttar Pradesh. Indian J Hum Genet 2012;18:43-6. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  10. Safarinejad MR, Shafi ei N, Safarinejad S. Relationship Between Genetic Polymorphisms of Methylenetetrahydrofolate Reductase (C677T, A1298C, and G1793A) as Risk Factors for Idiopathic Male Infertility. Reprod Sci 18: 304–315. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  11. Bezold G, Lange M, Peter RU. Homozygous methylenetetra hydrofolate reductase 677C.T mutation and male infertility. N Engl J Med 344: 1172– 1173. PubMed Google Scholar
  12. Singh K, Singh SK, Sah R, Singh I, Raman R. Mutation 677C.T in the methylenetetrahydrofolate reductase gene is associated with male infertility in Indian population. Int J Androl 28: 115–119. PubMed Google Scholar
  13. Park JH, Lee HC, Jeong YM, Chung TG, Kim HJ, et al. MTHFR 677C.T polymorphism associates with unexplained infertile male factors. J Assist Reprod Genet 22: 361–368. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  14. Stuppia L, Gatta V, Scarciolla O, Colosimo A, Guanciali-Franchi P, et al. The methylenetethrahydrofolate reductase (MTHFR) 677C.T polymorphism and male infertility in Italy. J Endocrinol Invest 26: 620–622. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  15. Ebisch IMW, van Heerde WL, Thomas CM, van der Put N, Wong WY, et al. 677C.T methylenetetrahydrofolate reductase polymorp-hism interferes with the effects of folic acid and zinc sulfate on sperm concentration. Fertil Steril 80: 1190–1194. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  16. Paracchini V, Garte S, Taioli E. MTHFR 677C.T polymorphism, GSTM1 deletion and male infertility: a possible suggestion of a gene/gene interaction? Biomarkers 11: 53–60. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  17. Tetik A, Aliyeva U, Cetintas VB, Semerci B, Topcuoglu N, et al. Influence of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) 677C.T and 1298 A.C gene polymorphisms on male infertility in turkish infertile men with azoospermia and oligozoospermia. Eur Urol Suppl 7: 92. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  18. Gava MM, de Oliveira Chagas E, Bianco B, Christofolini DM, Pompeo AC, et al. Methylenetetrahydrofolate Reductase Poly - morphisms Are Related to Male Infertility in Brazilian Men. Genet Test Mol Biomarkers 15: 153–157. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  19. Montjean D, Benkhalifa M, Dessolle L, Cohen-Bacrie P, Belloc S, et al. Polymorphisms in MTHFR and MTRR genes associated with blood plasma homocysteine concentration and sperm counts. Fertil Steril 95: 635–640. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  20. Lee S, Jeong YM, Lee SK, Cha KY, Chung TG, et al. The 677 C.T polymorphism in methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene associates with unexplained male infertility with severe OAT. Fertil Steril 80: 229. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  21. Heijmans BT, Gussekloo J, Kluft C, Droog S, Lagaay AM, et al. Mortality risk in men is associated with a common mutation in the methylenetetrahydrofolate reductase gene (MTHFR). Eur J Hum Genet 7: 197–204. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  22. Frosst P, Blom HJ, Milos R, Goyette P, Sheppard CA, et al. A candidate genetic risk factor for vascular disease: a common mutation in methylenetetrahydrofolate reductase. Nat Genet 10: 111–113. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  23. Van der Put NM, Gabree¨ls F, Stevens EM, Smeitink JA, Trijbels FJ, et al. A second common mutation in the methylenetetrahydro folate reductase gene: An additional risk factor for Neural -Tube Defects. Am J Hum Genet 62: 1044–1051. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  24. Gupta N, Gupta S, Dama M, David A, Khanna G, et al. Strong Association of 677 C.T Substitution in the MTHFR Gene with Male Infertility - A Study on an Indian Population and a Meta-Analysis. PLoS ONE 6(7): e22277. doi:10.1371/journal.pone.0022277 DOI Crossref PubMed Google Scholar
  25. Raman R, Narayan G. 5-Aza deoxyCytidine-induced inhibition of differentiation of spermatogonia into spermatocytes in the mouse. Mol Reprod Dev 42: 284–290. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  26. Thangaraj K, Joshi MB, Reddy AG, Gupta NJ, Chakravarty B, et al. CAG repeat expansion in the androgen receptor gene is not associated with male infertility in Indian populations. J Androl 23: 815–818 DOI Crossref PubMed Google Scholar
  27. Gupta N, Sarkar S, David A, Gangwar PK, Gupta R, et al. Significant Impact of the MTHFR Polymorphisms and Haplotypes on Male Infertility Risk. PLoS ONE 8(7): e69180. doi:10.1371/journal.pone. 0069180. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  28. Frosst P, Blom HJ, Milos R, Goyette P, et al. A candidate genetic risk factor for vascular disease: a common mutation in methylene tetrahydrofolate reductase. Nat. Genet. 10: 111-113. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  29. Prospective study of MTHFR genetic polymorphisms as a possible etiology of male infertility S.-S. Li1, J. Li1, Z. Xiao2, A.-G. Ren3. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  30. Zhu X, Liu Z, Zhang M, Gong R, Xu Y, Wang B. Association of the methylenetetrahydrofolate reductase gene C677T polymorphism with the risk of male infertility: a meta-analysis. Ren Fail. 2016 Mar;38(2):185-93. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  31. Mancheng Gong, Wenjing Dong, Tingyu He, Zhirong Shi, Guiying Huang,Rui Ren, Sichong Huang, Shaopeng Qiu and Runqiang Yuan MTHFR 677C>T Polymorphism Increases the Male Infertility Risk: A Meta-Analysis Involving 26 Studies. PLoS One. 2015; 10(3): e0121147. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  32. Han-Chul Lee, Yu- Mi Jeong, Sook Hwan Lee, Kwang Yul Cha, Seung-Hun Song,Nam Keun Kim, Kyo Won Lee and Suman Lee. Association study of four polymorphisms in three folate-related enzyme genes with non-obstructive male infertility. Hum. Reprod. 21 (12):3162-3170. DOI Crossref PubMed Google Scholar

Tam metni okuyun

PDF'yi burada aç

PDF yükleniyor…

PDF burada görünmezse yukarıdaki indirme düğmesini kullanın.

Bu makaleye nasıl atıf yapılır

Anand PP, Arumugam VA, Samuel CR. Methylene Tetrahydrofolate Reductase C677T Gene Polymorphism In Male Infertility. Ulutas Med J. 2017;3(1):1-4. doi:10.5455/umj.20170402052343

Anand, P. P., Arumugam, V. A., & Samuel, C. R. (2017). Methylene Tetrahydrofolate Reductase C677T Gene Polymorphism In Male Infertility. The Ulutas Medical Journal, 3(1), 1–4. https://doi.org/10.5455/umj.20170402052343

Anand, P.P., Arumugam, V.A. and Samuel, C.R. (2017) 'Methylene Tetrahydrofolate Reductase C677T Gene Polymorphism In Male Infertility', The Ulutas Medical Journal, 3(1), pp. 1–4. doi: 10.5455/umj.20170402052343.

RIS (EndNote, Zotero) BibTeX JATS XML
Bu makaleyi sitenize ekleyin

Bu kodu sayfanıza yapıştırın. Kart başlığı, yazarları ve DOI'yi gösterir ve makaleye bağlantı verir.

Uyumsuzluk bildir
Makale gönder İletişim