The Ulutas Medical Journal p-ISSN 2149-0430 e-ISSN 2149-388X

The Ulutas Medical Journal · ISSN 2149-0430 (مطبوع), 2149-388X (إلكتروني) · https://www.ulutasmedicaljournal.com/?mno=262966

بحث أصلي · وصول مفتوح

Methylene Tetrahydrofolate Reductase C677T Gene Polymorphism in Male Infertility

ترجمة آلية للعنوان والملخص والنص الكامل. الأصل الإنجليزي

  • Papitha P Anand1
  • Vijaya Anand Arumugam1
  • Chandra R Samuel2
  1. Department of Human Genetics and Molecular Biology, Bharathiar University, India ROR
  2. Department of Genetics, University of Madras, Taramani, Chennai, India ROR
تنزيل PDF (218.1 KB) طريقة الاقتباس doi:10.5455/umj.20170402052343

الملخص

Background: Methylenetetrahydrofolate reductase is an important enzyme which plays a major role in folate metabolism and DNAethylation. The objective of this study was to analyze the MTHFR C677T polymorphism in in infertile men. تصميم الدراسة: جُمعت عينات من الدم من 58 رجلاً من ذوي العقم، وأُخذت 55 مادة من مواد الرقابة، وهي خصبة. وقد أجري تحليل للطفرات من طراز C677T بواسطة منهجية بوليميرازي لتعددية البوليمورفيا على طول سلسلة ردود الفعل/التصدع. النتائج: The present study reveals that 23 Homozygous CC, 28 heterozygous CT, 7 TT were found in in in infertile men, whereas in control, the allele variations were 38 Homozygous CC, 17 heterozygous CT, but no Homozygous TT was found. الاستنتاج: As a result, Genotypes and allele frequencies found in in in infertile patients and controls but mutant allele was found only in in in in in infertile men. ولم يُلاحَظ إلا في الرجال الذين يعانون من نقص في الحيوانات المنبعثة، في حين أن الأشعة المقطعية المتفشية وجدت في كل من موضوعي oligozoospermia وazoospermia. وينبغي توسيع نطاق الدراسة بعدد كبير من العينات.

الكلمات المفتاحية

النص الكامل

ترجمة آلية للنص الكامل؛ النسخة المعتمدة هي الأصل الإنجليزي. الأصل الإنجليزي

مقدمة

الاستقلاب الحمضي الفلكي ذو أهمية بالنسبة لسلامة الجينوم واستقراره لأنه يؤدي دوراً رئيسياً في التوليف الحر للحمض النووي، ونمط ملوث الحمض النووي، وإصلاحه (1)ومن ثم، فإن النقص في استخدام الرغاوي أو البوليمورفيا في إنزيمات الممر الرغاوي قد يؤدي إلى توليف الحمض النووي البيرغي وميثيله. (ب) إن خليط هام من الميثيونين والقابلية النباتية، وهو يساعد بشكل حاسم على توليف الحمض النووي وميثيله. MTHFR reduces 5,10-methylene tetrahydrofolate to 5-methyl tetrahydrofolate which givesethyl group to homocysteine to form methionine. Methionine is ultimately converted to S-adenosyl methionine which acts as a ‘methyl’ donor for DNAethylation (2)Also,ethylenetetra hydrofolate involved in DNA synthesis by changing uracil to thymine (3)- في اختبارات الراشدين على فأر غيره من الأجهزة، يكون نشاطها عاليا، مما يمثل دورها في المتجانسات. (4, 5)وقد حددت البحوث الأخيرة التنظيم الوبائي للعديد من الجينات التي تؤدي دورا هاما في المتجانسات والخصوبة (6)وبالتالي، يمكن للتعديلات في جينات MTHFR أن تغير عملية المتجانسات وناقلات ما قبل التصرف إلى العقم (7, 8).

The length of MTHFR gene in human is 20 kb (20,336 bp) and located at 1p36.3 (OMIM 607093), having 11 exons (9)وقد تم تحديد أكثر من 40 مادة من البوليمورفيا في إطار المعايير المتوسطة الأجل، ولكن أكثر المتغيرات شيوعاً وأكثرها أهمية سريرياً هي C677T في فترة السنتين 4 وA1298C في فترة ما بعد 7 سنوات، ولكن الأكثر شيوعاً هي C677T of MTHFR gene has been identified to affect activity of this enzyme (10–15)البديل C677T يحل محل الألانين بالمهبل (A222V, rs1801133)، وهو أكثر الأشكال شيوعاً وشديداً لنموذج MTHFR (16–21)ويؤدي هذا الإحلال إلى انخفاض النشاط المحدد في إطار معايير الإبلاغ المالي المتعددة الأطراف وزيادة قابلية التعقيم (22).

متغير T677T Homozygous، 30 في المائة من النشاط المتبقي، ومتغير C677T المتردي يحتوي على 70 في المائة من النشاط المتبقي بالمقارنة مع البديل C677C (23)ويسفر هذا البديل أيضا عن تحسين مستوى الهوموستاين وانخفاض مستوى رباط البلازما. The frequency of C677T polymorphism differs with environmental and ethnic place (24)وقد أُوصي بأن يكون انخفاض مستوى الرغاوي المتصلة بتعددية البوليمورفولوجيا في إطار الاستراتيجية المتوسطة الأجل هو السبب في العقم بسبب تغيير توليف الحامض النووي وجزيئات الجيش الوطني الرواندي (4, 15).

ويمكن زيادة تركيز الحيوانات المنوية على أساس حمض الفوليك وكمية كبريت الزنك، وهذا يشير كذلك إلى أهمية هذا الممر في المسببات الطبيعية (14)هذا مدعوم أيضاً بالدراسة التي تحفز فيها المادة 5 من الأكسيدات المتدنية للميثيل، مما يحول دون التمييز بين حيوانات البيرماتوزا في الطراز المائي (25)ومن ثم، فإن تحليل التعددية في البوليمورفية من طراز C677T يتسم بأهمية لدى الرجال العقيمين في توضيح الارتباط بين متغيرات السيل والعقم الذكوري.

المنهجية

تم استخراج الحمض النووي الجيني من الدم الأيبيري للمرضى وعينات التحكم باستخدام طريقة الفينول - كلوروفورم - إيزوميل (26, 27)تم حل الحمض النووي المعزول في 1x (عمل) TE مع مساعدة rmomixer. The quantification and quality check of DNA was performed by subjecting the DNA to spectrophotometry (Nanodrop method). وتم تحليل عينة حامض النواة عند 260 نانو متراً و280 نانو متراً باستخدام مطياف الناندروب (Thermo Scientific, Germany).

والحمض النووي النقي هو A260/A280 /1.8 إلى 2. Value of 1,8 indicates protein and phenol contami-nation. وتشير قيمة .2 إلى إمكانية حصول التجمع الوطني الرواندي. وعلاوة على ذلك، تم تقييم سلامة الحمض النووي الجينومي عن طريق تشغيله على 0.8 في المائة من الجيل الأغاروز. PCR was carried out in a total reaction volume of 20 microl each in little walled tubes consisting of DNA 2 microl, ADW (autoclaved distilled water) 7.6mil, forward primer (59CATC CCTGGCAGTTACCC39) 0.2 kml, reverse (59 GGGAAGAACTCAGCGAAC TCAG39) primer (28, 29) 0.2 ميكرول، الماجستير 10 ميكرول. PCR cycling was carried out in Roch gradient PCR. وشملت شروط التعبئة الخاصة الاضطرابات عند درجة حرارة 95 درجة مئوية لمدة عشر دقائق، ثم 35 دورة من الاضطرابات عند 95 درجة مئوية لمدة 30 ثانية، وتصل إلى 63 درجة مئوية لمدة 30 ثانية، وتعدد درجة الحرارة عند 72 درجة مئوية لمدة 40 ثانية، والمرحلة النهائية من التكاثر عند 72 درجة مئوية لمدة 7 دقائق. After amplification, 0.5 microl of Hinf I as a restriction enzyme added to 0.5mil of amplified product and kept for 4 hours. مباشرة بعد 4 ساعات تم نقل القارورة إلى حمام المياه عند 80 درجة مئوية وبقيت لمدة 20 دقيقة. وأخيراً، تم تشغيل المنتج في 3% من كهرباء الجيل الأغاروز. The gel image was viewed using UV transilluminater.

النتائج

23 Homozygous CC, 28 heterozygous CT, 7 TT were found in in in infertile men, whereas in control, the allele variations were 38 Homozygous CC, 17 heterozygous CT, but no Homozygous TT was found in control samples. Mutant allele variation of homozygous TT was found in 7 infertile samples which belong to azoospermia and oligozoospermia category and 28 heterozygous CT was found in which majority belong to oligozoospermia as well as azoospermia subjects but low number allele frequencies were observed in other categories of infertzomoli

Figure 1: Gel electrophoresis showing RFLP. C1 and C2 are con-trols; MI1 to MI10 are Male infertile samples; M-50bp molecular marker.
Figure 1. Gel electrophoresis showing RFLP. C1 and C2 are con-trols; MI1 to MI10 are Male infertile samples; M-50bp molecular marker.

وحظيت هذه النتائج أيضا بدعم التحليل الدقيق في الدراسات التي أجريت سابقا. وتحظى ملاحظات دراستنا باهتمام خاص من الدراستين السابقتين اللتين أُجريتا بشأن السكان الهنود الذين أبلغوا عن نتائج تناقضية لما أُبلغ عنه في دراسة تحليلية أجراها زو وزملاء. وكشفت نتائجها عن وجود ارتباط بين تعددية المورفولوجيا في MTHFR C677T والعقم الذكور. وبالإضافة إلى ذلك، تم ربط المعيار MTHFR C677T بخطر كبير من الإصابة بداء الزومبي في كل نموذج وراثي. وفي الوقت نفسه، لم توجد في معظم النماذج الوراثية مخاطر متزايدة بدرجة كبيرة من الإصابة بمرض البوليغوستينتوريتوس. (30)- وخلصت دراسة تحليلية أخرى شملت 26 دراسة عن رابطة تعددية البوليمورفيينات MTHFR C677T مع عقم الذكور إلى أن تعددية المورفولوجيا MTHFR C677T لها ارتباط قوي بزيادة خطر عقم الذكور (31)وعلاوة على ذلك، شملت دراسة 360 رجلاً من ذوي العقم غير المعوّقين، وأبلغت عن ارتباط جمعية MTHFR C677T مع مرض الزومبي. (32).

خاتمة

وقد تبين أن النماذج الجينية وترددات الألياف أعلى مقارنة بالمواضيع العادية. Since, MTHFR gene plays a major role in regulation of spermatogenesis, allele variants can disturb the process resulting in male infertility. ومع ذلك، سيلزم عدد كبير من العينات، والدراسات الوبائية الجيدة التصميم والجودة النوعية من أجل تأكيد الارتباط بين تعددية المورفولوجيا MTHFR C677T والعقم الذكور.

الإقرارات

مساهمات المؤلفين (CRediT)
ساهم جميع المؤلفين بالتساوي في جميع أدوار CRediT الأربعة عشر (Conceptualization, Data curation, Formal analysis, Funding acquisition, Investigation, Methodology, Project administration, Resources, Software, Supervision, Validation, Visualization, Writing – original draft, Writing – review & editing).
التمويل

Funding information was not reported in the published version of this article.

تضارب المصالح
A conflict of interest statement was not reported in the published version of this article.
الموافقة الأخلاقية
Ethics approval details were not reported in the published version of this article.
إتاحة البيانات
A data availability statement was not reported in the published version of this article.

المراجع (32)

30 من أصل 32 مرجعًا مرتبطة بمعرّف DOI.

  1. Ravel C, Chantot-Bastaraud S, Chalmey C, Barreiro L, Aknin -Seifer I, et al. Lack of association between genetic polymorphisms in enzymes associated with folate metabolism and unexplained reduced sperm counts. Plos One 4: e6540. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  2. A ZC, Yang Y, Zhang SZ, Li N, Zhang W. Single nucleotide polymorphism 677C.T in the methylenetetrahydrofolate reductase gene might be a genetic risk factor for infertility for Chinese men with azoospermia or severe oligozoospermia. Asian J Androl 9: 57–62. 3. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  3. Lee HC, Jeong YM, Lee SH, Cha KY, Song SH, et al. Association study of four polymorphisms in three folate-related enzyme genes with non- obstructive male infertility. Hum Reprod 21: 3162–3170. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  4. Dhillon VS, Shahid M, Husain SA. Associations of MTHFR DNMT3b 4977bp deletion in mtDNA and GSTM1 deletion, and aberrant CpG island hypermethylation of GSTM1 in non-obstructive Infertility in Indian men. Mol Hum Reprod 13: 213–222. 5. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  5. Chen Z, Karaplis AC, Ackerman SL, Pogribny IP, Melnyk S, et al. Mice deficient in methylenetethrahydrofolate reductase exhibit hyperhomocysteinemia and decreased methylation capacity, with neuropathology and aortic lipid deposition. Hum Mol Genet 10: 433–443. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  6. Minocherhomji S, Madon PF, Parikh FR. Epigenetic regulatory mechanisms associated with infertility. Obstet Gynecol Int pii. 198709 p. MTHFR C677T Polymorphism In Male Infertility Papitha P Anand, et al. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  7. Khazamipour N, Noruzinia M, Fatehmanesh P, Keyhanee M, Pujol P. MTHFR promoter hypermethylation in testicular biopsies of patients with nonobstructive azoospermia: the role of epigenetics in male infertility. Hum Reprod 24: 2361–2364. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  8. Singh K, Singh SK, Raman R. MTHFR A1298C polymorphism and idiopathic male infertility. J Postgrad Med 56: 267–269. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  9. Rai V, Yadav U, Kumar P. Prevalence of methylenetetrahydrofolate reductase C677T polymorphism in eastern Uttar Pradesh. Indian J Hum Genet 2012;18:43-6. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  10. Safarinejad MR, Shafi ei N, Safarinejad S. Relationship Between Genetic Polymorphisms of Methylenetetrahydrofolate Reductase (C677T, A1298C, and G1793A) as Risk Factors for Idiopathic Male Infertility. Reprod Sci 18: 304–315. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  11. Bezold G, Lange M, Peter RU. Homozygous methylenetetra hydrofolate reductase 677C.T mutation and male infertility. N Engl J Med 344: 1172– 1173. PubMed Google Scholar
  12. Singh K, Singh SK, Sah R, Singh I, Raman R. Mutation 677C.T in the methylenetetrahydrofolate reductase gene is associated with male infertility in Indian population. Int J Androl 28: 115–119. PubMed Google Scholar
  13. Park JH, Lee HC, Jeong YM, Chung TG, Kim HJ, et al. MTHFR 677C.T polymorphism associates with unexplained infertile male factors. J Assist Reprod Genet 22: 361–368. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  14. Stuppia L, Gatta V, Scarciolla O, Colosimo A, Guanciali-Franchi P, et al. The methylenetethrahydrofolate reductase (MTHFR) 677C.T polymorphism and male infertility in Italy. J Endocrinol Invest 26: 620–622. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  15. Ebisch IMW, van Heerde WL, Thomas CM, van der Put N, Wong WY, et al. 677C.T methylenetetrahydrofolate reductase polymorp-hism interferes with the effects of folic acid and zinc sulfate on sperm concentration. Fertil Steril 80: 1190–1194. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  16. Paracchini V, Garte S, Taioli E. MTHFR 677C.T polymorphism, GSTM1 deletion and male infertility: a possible suggestion of a gene/gene interaction? Biomarkers 11: 53–60. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  17. Tetik A, Aliyeva U, Cetintas VB, Semerci B, Topcuoglu N, et al. Influence of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) 677C.T and 1298 A.C gene polymorphisms on male infertility in turkish infertile men with azoospermia and oligozoospermia. Eur Urol Suppl 7: 92. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  18. Gava MM, de Oliveira Chagas E, Bianco B, Christofolini DM, Pompeo AC, et al. Methylenetetrahydrofolate Reductase Poly - morphisms Are Related to Male Infertility in Brazilian Men. Genet Test Mol Biomarkers 15: 153–157. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  19. Montjean D, Benkhalifa M, Dessolle L, Cohen-Bacrie P, Belloc S, et al. Polymorphisms in MTHFR and MTRR genes associated with blood plasma homocysteine concentration and sperm counts. Fertil Steril 95: 635–640. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  20. Lee S, Jeong YM, Lee SK, Cha KY, Chung TG, et al. The 677 C.T polymorphism in methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene associates with unexplained male infertility with severe OAT. Fertil Steril 80: 229. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  21. Heijmans BT, Gussekloo J, Kluft C, Droog S, Lagaay AM, et al. Mortality risk in men is associated with a common mutation in the methylenetetrahydrofolate reductase gene (MTHFR). Eur J Hum Genet 7: 197–204. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  22. Frosst P, Blom HJ, Milos R, Goyette P, Sheppard CA, et al. A candidate genetic risk factor for vascular disease: a common mutation in methylenetetrahydrofolate reductase. Nat Genet 10: 111–113. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  23. Van der Put NM, Gabree¨ls F, Stevens EM, Smeitink JA, Trijbels FJ, et al. A second common mutation in the methylenetetrahydro folate reductase gene: An additional risk factor for Neural -Tube Defects. Am J Hum Genet 62: 1044–1051. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  24. Gupta N, Gupta S, Dama M, David A, Khanna G, et al. Strong Association of 677 C.T Substitution in the MTHFR Gene with Male Infertility - A Study on an Indian Population and a Meta-Analysis. PLoS ONE 6(7): e22277. doi:10.1371/journal.pone.0022277 DOI Crossref PubMed Google Scholar
  25. Raman R, Narayan G. 5-Aza deoxyCytidine-induced inhibition of differentiation of spermatogonia into spermatocytes in the mouse. Mol Reprod Dev 42: 284–290. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  26. Thangaraj K, Joshi MB, Reddy AG, Gupta NJ, Chakravarty B, et al. CAG repeat expansion in the androgen receptor gene is not associated with male infertility in Indian populations. J Androl 23: 815–818 DOI Crossref PubMed Google Scholar
  27. Gupta N, Sarkar S, David A, Gangwar PK, Gupta R, et al. Significant Impact of the MTHFR Polymorphisms and Haplotypes on Male Infertility Risk. PLoS ONE 8(7): e69180. doi:10.1371/journal.pone. 0069180. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  28. Frosst P, Blom HJ, Milos R, Goyette P, et al. A candidate genetic risk factor for vascular disease: a common mutation in methylene tetrahydrofolate reductase. Nat. Genet. 10: 111-113. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  29. Prospective study of MTHFR genetic polymorphisms as a possible etiology of male infertility S.-S. Li1, J. Li1, Z. Xiao2, A.-G. Ren3. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  30. Zhu X, Liu Z, Zhang M, Gong R, Xu Y, Wang B. Association of the methylenetetrahydrofolate reductase gene C677T polymorphism with the risk of male infertility: a meta-analysis. Ren Fail. 2016 Mar;38(2):185-93. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  31. Mancheng Gong, Wenjing Dong, Tingyu He, Zhirong Shi, Guiying Huang,Rui Ren, Sichong Huang, Shaopeng Qiu and Runqiang Yuan MTHFR 677C>T Polymorphism Increases the Male Infertility Risk: A Meta-Analysis Involving 26 Studies. PLoS One. 2015; 10(3): e0121147. DOI Crossref PubMed Google Scholar
  32. Han-Chul Lee, Yu- Mi Jeong, Sook Hwan Lee, Kwang Yul Cha, Seung-Hun Song,Nam Keun Kim, Kyo Won Lee and Suman Lee. Association study of four polymorphisms in three folate-related enzyme genes with non-obstructive male infertility. Hum. Reprod. 21 (12):3162-3170. DOI Crossref PubMed Google Scholar

اقرأ النص الكامل

افتح ملف PDF هنا

جارٍ تحميل ملف PDF…

إذا لم يظهر ملف PDF هنا، استخدم زر التنزيل أعلاه.

كيف تقتبس هذه المقالة

Anand PP, Arumugam VA, Samuel CR. Methylene Tetrahydrofolate Reductase C677T Gene Polymorphism In Male Infertility. Ulutas Med J. 2017;3(1):1-4. doi:10.5455/umj.20170402052343

Anand, P. P., Arumugam, V. A., & Samuel, C. R. (2017). Methylene Tetrahydrofolate Reductase C677T Gene Polymorphism In Male Infertility. The Ulutas Medical Journal, 3(1), 1–4. https://doi.org/10.5455/umj.20170402052343

Anand, P.P., Arumugam, V.A. and Samuel, C.R. (2017) 'Methylene Tetrahydrofolate Reductase C677T Gene Polymorphism In Male Infertility', The Ulutas Medical Journal, 3(1), pp. 1–4. doi: 10.5455/umj.20170402052343.

RIS (EndNote, Zotero) BibTeX JATS XML
تضمين هذه المقالة في موقعك

الصق هذا الكود في صفحتك. تعرض البطاقة العنوان والمؤلفين وDOI وترتبط بالمقالة.

الإبلاغ عن عدم اتساق
أرسل مخطوطة اتصل بنا