الأساس العلمي للتحليل المسبب للاختلالات في مواد الارتحال في إنفيترو

مقدمة

ويسفر حوالي 15 في المائة من حالات الحمل في الجولة الطبيعية الأولى عن الإجهاض العفوي. تم العثور على الانحراف الحراري في مواد التسرب المتكررة في 29-60% (1)ومن المثير للاهتمام أن معظم الانحرافات العددية تحدث بدلا من أن ترث (2)- في دورات الخصوبة/النقل البيئي، تكون معدلات الإجهاض التلقائي الأولى أعلى قليلا من الدورة الطبيعية. (3)وقد يعزى هذا الفارق إلى أن مجموعة المرضى في دورات التعليم المهني المتوسط تختلف من حيث العمر والهرمونات والسمات الوراثية مقارنة بالدورات الطبيعية. وبالإضافة إلى ذلك، قد يكون إخضاع المرضى في هذه المجموعة لمزيد من البحوث قبل العلاج من فيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز سببا آخر للاختلاف في المعدلات. وعلى الرغم من أن المناورات التي تحدث في معظم حالات الإجهاض تحدث نتيجة لتشويه الأعضاء التناسلية تحدث في المقام الأول (4)ونحن لا نعرف بوضوح العوامل التي تؤثر على مواجهة الشذوذ الوراثي في ناتج الحمل. إن الإجهاض الأول للمريض هو أهم عامل يزيد من خطر التعرض للتأديب. وعلى الرغم من أن الحمل الأول يؤدي إلى الإجهاض ويزيد من خطر الإجهاض في حالات الحمل اللاحقة، فإنه لا يزيد من خطر الإصابة بمرض الشذوذ الوراثي بنفس المبلغ (1)ومن المثير للاهتمام أن عدد حالات الكشف عن الشذوذ الكروموسومي في منطقة المحيط الهادئ يتناقص مع ازدياد عدد حالات الإجهاض. In line with this, the miscarriage rate increases with the number of previous spontaneous miscarriages. وعلى النقيض من ذلك، فإن تواتر العثور على اكتشاف غير طبيعي في POC ينخفض بدرجة كبيرة، كما أن النماذج الكاريوية العادية تزيد كثيرا مع عدد حالات سوء السلوك السابقة (1) وتشير هذه البيانات إلى أن حالات الإجهاض المتكررة تعزى إلى عوامل هيكلية وهرمونية تتصل بالأعضاء التناسلية وليس إلى عوامل وراثية. The presence of chromosomal anomaly in one of the partners leads to an approximately 5% anomaly in the POC. In recurrent miscarriages, at least one of the couples may have a 4.7% chromosomal defect (5)وهذه المعدلات صالحة في معظمها للإجهاض الذي يحدث في دورات طبيعية. وعلى الرغم من أن دورات الـ " بي إف تي " يُعتقد أنها تنطوي على معدلات مماثلة للإجهاض مع الدورات الطبيعية، فإن الصلة بين نموذج الكريوي في أي من الشريكين والنموذج الكاريوي في POC ليست واضحة. This study was planned to investigate the relationship between the karyotype of either partner of IVF-ET who experienced abortion before the 20^th الإسبوع الإحصائي واستنتاجات متجانسة في POC.

المواد والأساليب

This retrospective analysis assessed infertile women of miscarriage after IVF-ET happening between January 2015 and December 2019. وقدم المشاركون موافقتهم المستنيرة وأجريت الدراسة وفقا للمعايير الأخلاقية المبينة في نسخة مناسبة من إعلان هلسنكي لعام 1975، بصيغته المنقحة في عام 2000. تم الحصول على موافقة أخلاقية من لجنة الأخلاقيات في كلية الطب بجامعة إرسييس (تاريخ الموافقة وعدد القضايا؛ 2020-439). وقد عولج جميع المشاركين وفقاً لبروتوكول معادي معياري مع قيامهم فردياً بتغطية تكاليف الخدمات الصحية الاتحادية (المكتب) اعتباراً من اليوم 2-3 من الدورة الشهرية. بدأت شركة غونادوتروبين (Cetrotide, Merck, Germany) في 5^th أو 6^th يوم المحاكاة When at least three follicles reached 17 mm in diameter, maturation of follicles was induced with recombinant hCG (Ovitrelle, Merck-Serono, 250 mg, Modugno, BA, Italy). وأُجريت عملية جمع الأوقيات بعد 35 إلى 36 ساعة من تطبيقات شركة HCG. Ovarian follicles were aspirated using a single-lumen, 17-gauge needle (Cook Medical, Bloomington, IN, USA) guided by transvaginal ultrasonography (TV- USG). وقُيِّم الحمل في جميع المرضى الذين لديهم مصل بيا - ه. وتعرضت المرضى الذين حصلوا على نتيجة إيجابية هيدروجينيا HCG للتلفزيون - الولايات المتحدة واعتُبر الحمل السريري بحضور ضربات القلب الجنينية. وأُجريت أسابيع من الحمل وفقاً لتاريخ نقل الجنين وتم تأكيدها مع وكيل الأمين العام. وأُثبت تشخيص الإجهاض عن طريق فحص أمراض النساء وأشعة فوق البنفسجية. وأُدرجت الدراسة مجموعة مسترجعة مؤلفة من 192 امرأة عاجزة عُرضة للعلاج من فيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز وتعرضت للإجهاض قبل الـ 20 أسبوعا الأولى من الحمل. The following were determined as the basic inclusion criteria for the study; (i) those with a history of abortion in their personal or family history, (ii) advanced age patients who underwent IVF/ ET, (iii) those with a history of previous anomalies or stillbirths, and (iv) couples request this evaluation. The cases excluded from the study are; (i) the couple does not want this test, (ii) cases with obvious gynecological and hormonal causes that may lead to abortion, (iii) cases bringing abortion material from outside the hospital. وتشمل أسباب الإجهاض أسبابا كاملة وغير كاملة ومفقودة ومتكررة. ويرد في الجدول 1 - 122 توزيع أنواع الإجهاض حسب الأسابيع، وقد أُجهض لأول مرة، في حين كان لدى 70 منها تاريخان أو أكثر من تاريخ الإجهاض.

The patients were divided into three groups according to the gestational weeks of abortion. وبلغ عدد المرضى المصابين بالإجهاض بين 5 و7 أسابيع 45 مريضا، و 121 مريضا بين 8 و 12 أسبوعا، و 26 مريضا بين 13 و 19 أسبوعا. وبالمثل، في الحالات التي تُرتكب فيها مخالفات متكررة، قُسمت إلى ثلاث مجموعات وفقا لأسابيع من الإجهاض. وبلغ عدد المرضى الذين يتعرضون للإجهاض المتكرر بين 5 و7 أسابيع 15 مريضاً، و49 مريضاً بين 8 و12 أسبوعاً، و6 مرضى تتراوح أعمارهم بين 13 و19 أسبوعاً. وأُجري تحليل مسبب للتشهير بالكوريونية نتيجة للتصوير في أعقاب الإجهاض باستخدام تحليل مقارن للتهجين الجينومي (CGH) مع الفلور في التهجين الموقعي. وتم فحص أكثر من 20 زنزانة في مرحلة متقدمة والإبلاغ عنها. وجرى أيضا فحص تحليل نموذج الدم الفاصل لكل شريك. وقارنت النتائج التي توصل إليها الوالدان من النسيج النباتي بالنتائج التي تم الحصول عليها من الأنسجة الجنينية. وتم تقييم العلاقة بين نماذج الوالدين والأنواع التي تم الحصول عليها من ناتج الحمل.

التقييم الإحصائي

وأُجريت تحليلات إحصائية مع حزمة برامجيات البرمجيات الإحصائية (Utah, USA). In addition to descriptive statistical methods (mean,standard deviation, median, interquartile range) in the evaluation of the data, the independent t-test was used for comparison of the coupleed groups of the variables with normal distribution, and Mann-Whitney U test for the couplewise comparison of the groups with nonnormally distributed variables. واستُخدم الاختبار الدقيق للزجاج والصيد في مقارنة البيانات النوعية. وقُيِّمت النتائج على مستوى مغزى مشروع " p0.05 " .

النتائج

ويرد في الجدول 1 توزيع أنواع الإجهاض وفقا للأسابيع الإحصائية، وترد الخصائص الديمغرافية لجميع الحالات في الجدول 2. The ages of the participants were between 20-44. وكانت المواد الجنينية التي تم فحصها وراثيا تتراوح بين 5 و 19 أسبوعا في المتوسط. ومن بين المرضى البالغ عددهم 192 مريضاً من الفئة الرابعة الذين تعرضوا لإجهاض، كان لدى 122 مريضاً أول إجهاض لهم (المجموعة 1) في حين كان لدى 70 مريضاً تاريخاً يتعلق بحادثين أو أكثر (المجموعة 2).

مجموعتان فيما يتعلق بمؤشر كتلة الجسم، وعمر الأم، ومستوى البروجسترون، وسماكة نهاية العمر، وتعداد الأوسيت الكلي، والزواج المختلط، والترومبوفيليا، والتدخين. وكانت قيم Estradiol في يوم المجموعة الأولى للإجهاض أعلى من المجموعة المتكررة للإجهاض (p=0.035). In recurrent miscarriage, the risk was 2,29 (0,91-5,86) for consanguineous marriage, 2,28 (1–5, 14) for trombophilia and 1.92 (1,02-3,65) for smoke.

While abnormal karyotype was found in 22 of 30 patients (73.33%) who experienced first miscarriage between 5-7 weeks, 65 of 85 cases (76.47%) who experienced first miscarriage between 8-12 weeks and 5 of 7 cases (71.42%) who experienced first miscarriage between 13-19 weeks had karyotype anomalies. While karyotype anomaly was found in the POC of 92 out of 122 cases (75.4%) with the first abortion (Table-3), no pathology was detected in the remaining 30 cases (24.59%). While karyotype anomaly was detected in the POC of 28 of 70 (40%) with recurrent miscarriage (Table-4), no pathology was detected in 42 (60%). وأُجري تحليل نموذجي على 192 زوجاً من ذوي السوابق القضائية. وكشفت حالات الشذوذ الكاريومية في 19 والداً و10 إناث و9 ذكور. نتاج تصور 7 من 10 (70 في المائة) مع شذوذ ساكن. ولم يكشف عن الشذوذ المسبب للسرطان إلا في 3 مواد مضللة من 9 حالات لها شذوذ مسبب للمرض الأبوي (33.3 في المائة). والمقارنة الإحصائية بين نوع الجنس والعثور السيتيولوجي غير ممكنة لأن النماذج التي تم الحصول عليها تختلف تماما عن بعضها البعض. In the presence of different genetic analysis reports, only the number of abnormal cases can be compared between groups. While the risk of cytogenetic anomalies in the POC was 70% in cases with karyotype anomaly in the expectedant mother, the risk of cytogenetic anomaly in the POC of the cases with karyotype anomaly in the male partner was approximately 33%. ولم يكن الفرق كبيرا (p=0,25). ولكن خطر الشذوذ الرئوي في POC كان يبلغ 467 (067-22,37) مرة في النساء ذوات الشذوذ الكريوي أكثر من الشركاء الذكور في الشذوذ الكاريوي.

وقد اكتشف الشذوذ الكاريوي في مقاطعتي POC التي تضم 10 من أصل 19 من الآباء الذين أعاقت نماذجهم (52.6 في المائة). ومن ناحية أخرى، لم تتداخل في معظم الحالات الشذوذات التي اكتشفها كل من الشريكين والنموذج الكاريوي في النتائج التي توصلوا إليها من قبل الشركة. خمس نساء من أصل 10 نساء ذوات طابع كاريوي غير اعتيادي وبالمثل، فإن 4 من بين 9 رجال مصابين بنوع كاريوي غير طبيعي قد تعرضوا لإجهاض. وعثر على النتائج المسببة للاختلال في مواد التسرب الخاصة بالوالدين اللذين يحملان نموذجا غير عادي (الجدول 5 والجدول 6). وكان عشرون مريضاً من أصل 192 مريضاً قد حصلوا على زواج مختلط، ولم يكن هناك سوى 8 من المرضى الذين حصلوا على انحراف كروموسومالي من شركة POC.

المناقشة

وشهدت نسبة 10 في المائة تقريبا من النساء في فترة الإنجاب تشوهات متجانسة في ناتج الحمل (6)معظم حالات الحمل المزيف إما أن تموت في الرحم أو تؤدي إلى إجهاض (3)- إذا أجري التقييم الوراثي في مركز العمليات الخاصة لأول مرة، يمكن الكشف عن الشذوذ الكروموسومي في أكثر من نصف الحالات (7)- في الحالات التي يوجد فيها نموذج كاريوي طبيعي في أول مادة للإجهاض، لوحظت زيادة في خطر الإصابة بالكروموسومات الطبيعي في الحمل التالي (8)الترايسومي الأكثر شيوعاً هو الترايسومي 16 في POC (9)كما أن الترايسومي 21 و 18 و 13 يحدث في بعض المواليد الأحياء (10)- وفي الدراسة، أجرينا تحليلا بأثر رجعي لدراسة تواتر الشذوذ الكروموي في منتجات الحمل من مرضى مصابين بتشوهات أولية ومتكررة فيما يتعلق بأورام الخلايا الأبوية. ودرسنا 122 حالة حمل مع تاريخ من حالات الإجهاض الأولى و 70 حالة حمل مع إجهاضين أو أكثر متتاليتين من الدرجة الأولى. وقد درست ترددات النماذج الكاريونية الشاذة/الطبيعية أو الشاذة أوّلاً وحالات التشوه المتكررة. وأُجري تحليل كروموسومالي على أساس POC باستخدام تقنية FISH. 122 من أصل 192 مريضا من مرضى فيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز تعرضوا لأول إجهاض بينما كان لدى 70 مريضا تاريخ في 2 أو أكثر من حالات سوء السلوك. يمكن اكتشاف حوالي 70 في المائة من أوّل شذوذ إشعاعي جيني في POC (1) In this study, the incidence of cytogenetic anomalies in POC of cases who had abortion in the first 12 weeks of pregnancy was 75.4%. وهذا المعدل أعلى بنسبة 5 في المائة من البيانات الأدبية. وبما أن جميع الأخطاء التي حدثت في مجموعتنا قد حدثت بعد وقوعها في محطة الفضاء الأوروبية، فإن هذا الفرق قد يعتمد على عقيدة المشاركين. لأن معظم الأفراد في حالات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز هم أكبر سناً من الدورات الطبيعية ولديهم مجموعة من المرضى الذين يحتمل أن يخضعوا للبحوث الوراثية. It has been reported that chromosomal anomaly detection rate is about 5% in at least one of the partners who had miscarriage. In recurrent miscarriages the rate of a cytogentic problem is high in at least one of the partners (5)- وفي دراستنا، تم الكشف عن الأورام المسببة للاختلال في عام 19 شخصا، بما في ذلك 10 نساء و 9 ذكور. هذا المعدل متوافق مع الأدبيات (5)- وفي دراستنا، كان الشذوذ الكروموسومي الهيكلي في منطقة المحيط الهادئ أكثر النتائج شيوعا بين النساء ذوات النمط الشاذ. ومن ناحية أخرى، كانت العيوب الكروموسومية العددية في POC هي أكثر العيوب شيوعا في الشريك الذكر مع نتائج غير طبيعية. وبالمقارنة مع التضليل المتكرر، كان انتشار الشذوذ الكروموزومي أعلى بكثير في الحالات التي شهدت أول خطأ. وبالمثل، فإن تواتر أنواع الكريوانات الجنينية العادية في المواد المضللة قد زاد بدرجة كبيرة في الشريك الذكور مع نموذج كاريو غير عادي بالمقارنة مع شريكات لديهن نتائج غير طبيعية. While the risk of cytogenetic anomalies in the POC was 70% in cases with karyotype anomaly in the expectedant mother, the risk of cytogenetic anomaly in the POC of the cases with karyotype anomaly in the male partner was approximately 33%. وكان الفرق ضئيلاً من الناحية الإحصائية، ولكن خطر الإصابة بمرض الشذوذ المسبب للاختلالات في منطقة المحيط الهادئ وجد أنه أعلى بـ67 4 مرة في النساء ذوات الشذوذ الكاريوي.

وفي ضوء هذه النتائج، يمكننا القول إن مشاكل الكريولية في الأم تنعكس في الجنين أكثر من المشاكل التي يعاني منها الأب. وعلى الرغم من أنه ليس من الممكن تفسير السبب بوضوح، يمكننا أن نجادل بأن وجود أوسيت صحي يمكن أن يصحح الآثار السلبية للحيوانات غير الطبيعية إلى حد ما. غير أنه من الواضح أن هذه الفرضية تحتاج إلى التحقيق بالتفصيل.

Although there were similar karyotypes in some cases, cytogenetic anomalies belonging to parents and anomalies detected in the POC were independent of each other. For example, karyotype was 47,XX+21 in miscarriage material in which the mother had 46, XX and the father had 46,XY,16qh+ karyotype. ويُكتشف أيضاً وجود شذوذ كروموسومات عديدة في الأبوين في POC لمعظم حالات الجنح. ومن المثير للاهتمام أن العيوب الكروموسومية الهيكلية تظهر أحياناً كعيوب كرومومية رقمية في POC. على سبيل المثال، في POC للأم التي لديها 46,XX,inv(9) (p11q13) anomaly, 47,XXY karyotype was detected. وتشير هذه البيانات إلى أن حالات الشذوذ الكروموسومي في الأبوين قد تظل هي نفسها التي تنقل إلى الجنين، أو قد تعود إلى شذوذ رقمي أكثر خطورة. وفي ضوء جميع هذه البيانات، لن يكون من الخطأ أن يوحي بأنه ينبغي تحليل الأفراد الذين لديهم تاريخ أول أو تاريخ متكرر للإجهاض بطريقة غير متجانسة. وهكذا، يمكننا أن نتعلم احتمال وجود شذوذ من نوع كاريوي أكثر جدية في الحمل القادم للزوجين مع شذوذ هيكلي كروموز في أول POC. بإعطاء التشخيص الوراثي الافتراضي لهذه القضايا، يمكننا مساعدتهم على الإنجاب لأطفال صحيين.

وفي الأسابيع الـ 19 الأولى من الحمل، بلغ معدل الكريول الشاذ في مواد الإجهاض 75.4 في المائة. وعندما أجري تحليل للمجموعات الفرعية وفقا لأسابيع تقليدية، تبين أن معدلات اللقاءات غير الشاذة من النوع الكري مماثلة. وبعبارة أخرى، فإن معدل الكشف غير الشاذ للنوع الخلوي في POC للنساء اللواتي أُجهضن في الفترة من 5 إلى 7 أسابيع الأولى من الحمل مماثل للحالات التي تتراوح بين 13 و 19 أسبوعا (73.3 في المائة مقابل 71.42 في المائة).

وكان المعدل العام للأنواع الخبيثة في POC هو 75.4 في المائة (92/122) في الحالات التي شهدت أول حادث، كما أن معدل النتائج غير الشاذة المرتبطة بالنتائج غير الشاذة للكروموسومات في أي من الشريكين بلغ 52.63 في المائة (10/19). Although there was a karyotype anomaly in the parents, no chromosomal anomaly was detected in nine POC (47.4%). ويمكننا تفسير هذه البيانات على النحو التالي: If any of the parents have karyotype anomalies, the risk of cytogenetic anomaly is observed in approximately half of the babies, while the other half does not have any risk. In the first 20 weeks of pregnancy, 120 of 192 cases with miscarriage history had karyotype anomaly in POC (62.5%). While only 10 of 120 cases had karyotype anomaly in one of the parents (8.3%), the remaining 110 parents had normal karyotype (91.7%). والتفاوتات التي تحدث في دورات الصندوق المشترك للمعاشات التقاعدية لموظفي الأمم المتحدة هي أكثر احتمالا بنسبة 3.3 في المائة بأن يكون هناك تشوهات من النوع الكريوي في أحد الشركاء مقارنة بالدورات الطبيعية. ولهذا السبب، لا توجد حاجة إلى إجراء تحليل نموذجي في آباء الحالات التي يشوبها شذوذ كروموسومي في منطقة المحيط الهادئ.

In the present study the risk of karyotype anomaly was found to be lower in patients with recurrent miscarriage (RM) compared to those who first experienced abortion (40% vs. 75.4%). وتمشياً مع النتائج التي توصلنا إليها، تظهر البيانات الأدبية أيضاً وجود نماذج طبيعية في قضايا إدارة المخاطر المؤسسية (11, 12)وبالرغم من وجود نموذج كاريوي غير عادي في POC من 28 حالة من أصل 70 حالة ذات تاريخ إجهاض متكرر (40%)، فقد أُبلغ عن 42 حالة كنموذج كاريوي عادي (60 في المائة). The frequency of detection of chromosomal anomaly in the POC may be declining, since the etiology of most RM cases is due to the presence of antiphospholipid antibody, endocrine pathologies or uteomaly (13, 14)ومن المثير للاهتمام أن معدلات الكميات غير العادية في POC قد انخفضت في 13-19 أسبوعا (40-16.6 في المائة) بالمقارنة مع حالات التسرب المتكررة في 5-7 أسابيع. معدل الكشف عن الشذوذ الكريوي في الحالات التي تشهد أول جنحة في 7 حالات^th الأسبوع الإحصائي وما بين 8-12^th وُجدت أسابيع مماثلة. وبعبارة أخرى، فإن حدوث الجنحة في الأسابيع السبعة الأولى من الحمل أو ما بين 8 و 12 أسبوعاً لا يغير معدل حدوث الشذوذ المسبب للإلتهاب الكبدي في منطقة المحيط الهادئ. لهذا السبب، في كل الأخطاء الثلاثية الأولى، الأطباء يجب أن يقرروا ما إذا كان لإجراء تحليل متجانس وفقاً لتاريخ المريض وخبرته السريرية. ومن جهة أخرى، ونظراً إلى أن هناك احتمالاً منخفضاً لحدوث شذوذ من نوع كاريوي في أسابيع الحمل المتقدمة في حالات الإصابة بالإيدز، فإن إجراء تحليل من نوع كاريوي لا يوفر أي فائدة إضافية. Carpet al (2) ولا يوجد لدى المرضى المبلَّغ عنهم الذين يرتدون الزيوت الكروموزومية معدل كبد أدنى بكثير من المعدل في المرضى الذين لا يعانون من انحرافات كروموسومية. وفي ضوء نتائجنا وبيانات الأدبيات، يمكننا أن نقترح أن لا يكون تحديد اللغة الأبوية تنبؤا جيدا بنتائج حالات الحمل اللاحقة. غير أنه من أجل التوصل إلى نتيجة واضحة، ينبغي إجراء فحص متجانس على جميع المركبات العضوية الثابتة اللاحقة.

وعلى الرغم من أن التصوير الفلكي هو جزء من إدارة الإجهاض التلقائي أو المتكرر، فإن نتائجنا تشير إلى أن تحديد اللغة الأبوية له قيمة محدودة في تشخيص السبب الأساسي. The aneuploidy rate in POC following IVF-ET was found to be approximately 5% more than natural spontaneous miscarriages (70% vs. 75.4%). وقد يكون هذا الفرق متصلا بطبيعة دورات الصندوق المشترك للمعاشات التقاعدية. ويرجح أن تكون حالات سوء السلوك التي تحدث في دورات التعليم المهني العالي 3.3 في المائة من حالات الشذوذ الكاريوي في أحد الشركاء أكثر من الدورات الطبيعية (5% مقابل 8.3 في المائة).

وزاد تواتر الكيماويات الجنينية العادية في المواد المضللة زيادة كبيرة في الشركاء الذكور من النوع الكريوي الشاذ مقارنة بالشريكات ذوات النتائج غير الشاذة. ونظراً إلى أن الطباعة في POC هي تنبؤ غير مباشر بتأبين الجنين، فإن قيمتها المتوقعة محدودة. وأخيراً، لا نوصي بأن تكون المرأة التي تمر بدورات في دورات التعليم المهني المتوسط. وأجريت دراستنا بعدد أكبر من المرضى بشكل ملحوظ. ومع ذلك، هناك حاجة إلى دراسات متعددة المراكز تحدد تشخيص المرضى على المدى الطويل.